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適切なHPLCカラムを簡単に見つけやすい(LabFab Vol.10 June 2012)

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これまで弊社e-Nacalai ではELISA、抗体、構造式など様々な専用検索を提供してきましたが、この度、HPLCカラム専用検索を新設しました。ぜひご活用ください。

記事は

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医薬品の分析に最適な3μmC18 カラム(LabFab_Chemicals_2012_October)

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コスモシール3C18-EB は、医薬品成分など塩基性化合物に対してテーリングすることなくシャープなピーク形状が得られます。シャープなピーク形状により正確な定性・定量分析を可能にしたカラムです。今回は他社製品との比較と、医薬品の分析例をご紹介します。

記事は

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(425KB)

 

塩基性化合物に最適カラム COSMOSIL3C18-EB(LabFab Vol.10 June 2012)

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このたび発売しました3C18-EB は、従来のC18 カラムとは全く異なるエンドキャップ処理を施すことにより残存シラノールに対して高い遮蔽効果が得られる様になりました。このことにより塩基性化合物に対して従来のカラムと比較しても非常に良好なピーク形状となります。また簡便な合成スキームを採用することにより合成再現性に優れ、優れた分析再現性を実現しました。

記事は

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(429KB)

 

COSMOSIL HILICを用いた4-メチルイミダゾール(4-MI)などの分析(LabFab Vol.10 October 2012)

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食品に含まれる成分の分析は、安全性、品質上、重要な工程です。食品成分をHPLC で分析した例をご紹介します。

記事は

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抗体の分析に有効(LabFab Vol.10 December 2012)

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タンパク質分離用イオン交換HPLC カラムのCOSMOGEL® IEX シリーズは、精製用カラム以外に精密分析用もラインアップしています。精密分析用カラムは、非常に高い分離能を有するため抗体医薬など抗体分析に有効なカラムとなります。今回、イオン交換カラムを用いたモノクローナル抗体の分析例の一部をご紹介します。

記事は

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(478KB)

 

COSMOGEL® IEX による生体成分やタンパク質の分析

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タンパク質分離用イオン交換HPLC カラムのCOSMOGEL® IEX シリーズは、非常に高分離であることで評判を
いただいています。本製品を用いた生体成分やタンパク質の分析例が、お客様からご提供いただきましたデータも追加され、益々充実して参りました。今回は分析例の中から、一部をご紹介します。
様々な分析例は、弊社Web site(http://www.nacalai.co.jp/cosmosil/data/csmosrchtop.cfm)で公開していますので、是非、ご参照ください。

記事は

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(570KB)

 

COSMOSIL HILICによる豊富な分析例を収載(LabFab Vol.10 August 2012)

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親水性相互作用クロマトグラフィーは、親水性化合物を高感度分析する手法として注目されています。弊社では、コスモシール HILIC をラインアップしています。コスモシール HILIC を用いた分析例をご紹介します。
他の分析例についてはWeb site(http://www.nacalai.co.jp/cosmosil/data/csmosrchtop.cfm)で公開していま
すので、ご参照ください。

記事は

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(583KB)

 

トリアゾール結合型HILIC カラム(LabFab Vol.10 February 2013)

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コスモシールHILIC は、トリアゾールを結合した親水性相互作用クロマトグラフィー用カラムです。この固定相の効果により従来の親水性相互作用に加えて陰イオン交換能を有します。これにより広範囲の化合物に対して高分離を示します。この2つの相互作用の使い分け方法についてご紹介します。

記事は

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MicroStem社 細胞外マトリックス(ECM)アレイ

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適切なECM環境の選択に最適

 

microstem-web.gif

 

 

 

 

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The MicroMatrix™ cell culture system is an in vitro  system for live cellular attachment of cells to 36 combinations of extracellular matrix protein composed microenvironments.  Compositions have been miniaturized in the form of 400µm uniform circular spots to support a cell based assay. The system relies on a cell type of interests inherent affinity towards a particular ECM combination for adherence. Cell based assays may be performed directly on the system.  Assays are end user defined and readouts may include standard fluorescence based imaging and whole cell colormetric staining.  Assays can be real-time or end-point and can be perform

ed using standard cell culture equipment.

 

microstem fig2.JPGmicrostem fig3.JPG

 


ECMP components of each block.
Collagen I (250μg/ml) Collagen I (125μg/ml)
Collagen III (125μg/ml)
Fibronectin (125μg/ml)
Collagen IV (125μg/ml)
Collagen III (250μg/ml) Collagen I (125μg/ml)
Collagen IV (125μg/ml)
Fibronectin (125μg/ml)
Collagen VI (125μg/ml)
Collagen IV (250μg/ml) Collagen I (125μg/ml)
Collagen V (125μg/ml)
Fibronectin (125μg/ml)
Laminin (125μg/ml)
Collagen V (250μg/ml) Collagen I (125μg/ml)
Collagen VI (125μg/ml)
Fibronectin (125μg/ml)
Vitronectin(125μg/ml)
Collagen VI (250μg/ml) Collagen I (125μg/ml)
Fibronectin (125μg/ml)
Laminin (125μg/ml)
Collagen IV (125μg/ml)
Fibronectin (250μg/ml) Collagen I (125μg/ml)
Laminin (125μg/ml)
Laminin (125μg/ml)
Collagen VI (125μg/ml)
Laminin (250μg/ml) Collagen I (125μg/ml)
Vitronectin (125μg/ml)
Vitronectin (125μg/ml)
Collagen IV (125μg/ml)
Vitronectin (250μg/ml) Collagen I (125μg/ml)
Topoelastin (125μg/ml)
Vitronectin (125μg/ml)
Collagen VI (125μg/ml)
Tropoelastin (250μg/ml) Fibronectin (83.3μg/ml)
Laminin (83.3μg/ml)
Collagen I (83.3μg/ml)
Vitronectin (125μg/ml)
Laminin (125μg/ml)
Collagen IV (125μg/ml)
Collagen VI (125μg/ml)
Fibronectin (83.3μg/ml)
Laminin (83.3μg/ml)
Collagen IV (83.3μg/ml)
Vitronectin (125μg/ml)
Topoelastin (125μg/ml)
Collagen III (125μg/ml)
Collagen V (125μg/ml)
Vitronectin (62.5μg/ml)
Laminin (62.5μg/ml)
Collagen I (62.5μg/ml)
Collagen IV (62.5μg/ml)
Topoelastin (125μg/ml)
Collagen IV (125μg/ml)
Negative Control
BSA (250μg/ml)
Fibronectin (62.5μg/ml)
Laminin (62.5μg/ml)
Collagen I (62.5μg/ml)
Collagen IV (62.5μg/ml)
Topoelastin (125μg/ml)
Collagen VI (125μg/ml)

Concentrations indicated in parentheses represent the concentration of the ECMP in the solution that is spotted on the slide.Each block contains a unique ECMP condition with 9 replicate spots. Spot diameter is 400 μm. Distance between spots in each block is 500 μm from center to center.Each block is 4.5 mm in diameter.

 

Examples of cell attachment within a single condition (9 replicate spots) on a MicroMatrix™ 36 slide.

microstem fig1.JPGLeft image is MCF 7 cells. Right image is human hepatocytes. Images were taken on a 5× objective lens on a Leica DMIL microscope system.

Reduced Protocol

 In a sterile hood: 

  1. Remove MicroMatrix slide and the four-chambered cell culture tray from package, do not touch the surface of the slide
  2. Place the slide in one of the chambers of the tray (logo on the slide should be bottom right)
  3. Add cells in 5ml media onto the slide
  4. Incubate cells (3 hours - 2 days) until sufficient cell attachement is observed
  5. Aspirate away unattached cells and perform user defined experiments
  6. Fix/stain/image/analyze (end user defined)

Kit Components

1. One 75mm x 25mm hydrogel coated glass slide pre-printed with 36 ECMP combinations of collagen I, collagen III, collagen IV, collagen V, collagen VI, fibronectin, laminin, vitronectin and tropoelastin in a slide case

2. One four-chambered slide culture tray

Product Name Catalog No  Details

MicroMatrix™ 36 ECM Array

MM012011

 

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Cytoskeleton社 Arf1とArf6の活性化アッセイキットとGTPaseアフィニティービーズ

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2つの方法から、お選びいただけます。

 090324Cytoskeleton Gold C logo (one protein).jpg

 

 

 

 

 

 

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Arf1 and Arf6 Activation Assays and
GTPase Affinity Beads

 

 cytoskeleton Arf1 and Arf6.png

Cytoskeleton’s Arf1 and Arf6 activation assays are in two formats: G-LISAs and pull-downs. G-LISAs use a 96 well plate coated with an effector protein that selectively binds active Arf1 or Arf6, followed by quantitation with ELISA techniques. Typical Arf6 G-LISA data are shown (right). Arf pull-downs utilize the Arf1 and Arf6 protein binding domain (PBD) of the effector protein GGA3 (Golgi-localized γ-ear containing, Arf-binding protein 3), which specifically binds the GTP-bound form of Arf1 and Arf6. The GGA3-PBD is covalently conjugated to colored sepharose beads, enabling the “pull-down”of active Arf1-GTP and Arf6-GTP for quantification by Western blotting. 

 

 

 

 Right: Arf6 activation measured by G-LISA.  Lysates for Arf6 G-LISA were prepared from MDCK cells that were either attached to tissue culture plates (activated) or kept in suspension for 2 hours (control).  12.5, 6.25, and 3.1 ugs of cell lysates were subjected to the G-LISA assay (Cat. # BK133). Absorbance was read at 490 nm. Data are background subtracted.

 

 

Products

  • Arf1 G-LISA Activation Assay Biochem Kit (Cat. # BK132)
  • Arf1 Activation Assay Biochem Kit (Pull-down format) (Cat. # BK032-S)
  • Arf6 G-LISA Activation Assay Biochem Kit (Cat. # BK133)
  • Arf6 Activation Assay Biochem Kit (Pull-down format) (Cat. # BK033-S)
  • GGA3-PBD Beads (Cat. # GGA05)

 

 

 

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Tocris社 2013年2月新製品

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tocris-logo-web.jpg

 

 

 

 

 

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New products are an essential component of our range. Introductions are made on an ongoing basis, with hundreds of new small molecules, peptides and antibodies being added every year. Our aim is to find the latest, otherwise unobtainable research tools, and bring them to the market as quickly as we can.

 

                               

Cat.No. Product Name Activity
4799 Capecitabine Prodrug of 5-Fluorouracil (Cat. No. 3257). Inhibits DNA synthesis
4798 (S)-Duloxetine hydrochloride Potent 5-HT and NE reuptake inhibitor; also blocks dopamine reuptake
4786 PD 0332991 isethionate Potent, selective Cdk4/6 inhibitor; brain penetrant
4537 NCX 466 Cyclooxygenase-inhibiting nitric oxide donor
4754 AK 7 Selective SIRT2 inhibitor; brain penetrant
4674 CZC 24832 Selective inhibitor of PI 3-Kinase γ
4670 SB 611812 Urotensin-II (UT) antagonist; attenuates cardiac dysfunction
4365 TC-MCH 7c Selective melanin-concentrating hormone receptor 1 (MCH1R) antagonist
3379 Phenamil Inhibits TRPP3-mediated currents; also inhibits epithelial Na+ channels
4781 ANA 12 TrkB receptor antagonist
4761 Plumbagin Induces G2/M cell cycle arrest; anticancer
4731 KY 02111 Promotes differentiation of human ESCs and iPSCs into cardiomyocytes
4717 Jervine Inhibitor of Hedgehog (Hh) signaling; binds directly to Smo
4700 PU 02 Negative allosteric modulator of 5-HT3
4676 ARRY 520 trifluoroacetate Potent and selective kinesin spindle protein (KSP) inhibitor; induces Mcl-1 degradation
4554 GC 1 High affinity thyroid receptor α (TRα) and TRβ agonist; thyromimetic
3380 Benzamil NCX inhibitor, Deg/ENaC channel blocker; amiloride (Cat. No. 0890) derivative
 

 

         

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1液タイプのCBB R-250染色液CBB Stain One Super(Ready To Use)

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CBB-R250色素を採用したCBB Stain One Superを発売しました。汎用されているCBB-R250色素特有の青紫色のバンドで、従来のCBB Stain One(Ready To Use)と比較し染色バンドが見やすくなった1液タイプの染色液です。

特長
  • CBB-R250採用のready to use染色液
  • 刺激の強い酢酸やメタノール不含
  • 短時間で染色可能
  • 精製水だけで迅速に脱色
製品比較

弊社従来品のCBB Stain Oneと比較した場合、本製品は濃い色調のCBB-R250色素を採用したことにより、染色時間も短縮されています。また、Rapid Stain CBB kitと比較した場合、本製品は、1液タイプで調整の手間が不要かつ刺激性の強い酢酸も含まれていません。 

 CBB Stain One Super
(#11642)
CBB Stain One
(#04543)
Rapid Stain CBB kit
(#30035)
色素  CBB-R250  CBB-G250  CBB-R250
形状

・1液タイプ

・酢酸、メタノール不含

 ・1液タイプ

・酢酸、メタノール不含

・2液タイプ

・酢酸含有、メタノール不含

染色時間  30分 60分  20分
脱色時間  6時間~1晩  6時間~1晩  1晩
検出感度 数十ng
性能比較

本製品は、他社のR250色素を採用している製品と比較し、同等以上の感度や視認性が得られています。また、G250色素を採用している従来のCBB Stain Oneと比較し、感度は同等ですが、濃い色調で染色されるため視認性が高くなっています。 

  CBB Stain One Superseinouhikaku.gif
条件
ゲルサイズ: 7.5cm×9cm×1mm(ミニゲル)
泳動ゲルのアクリルアミド濃度: 12%
サンプル: タンパク質マーカー(10x)(#29458)を以下の希釈倍率で使用。
①1/3、②1/10、③1/30、④1/100
染色や脱色の操作は、各製品のプロトコールに準じています。
使用方法

本製品の使用方法の概要を示します。

 CBB-Stain-One-Supersiyouhouhou-4.gif
 
<電子レンジ染色法>
  • 電子レンジを使用することで、染色時間が通常法の1/4に短縮できます。参考として電子レンジを使用した迅速方法を紹介します。弊社では、色調や感度は同等であることを確認していますが、通常法をお試しの上、ご利用ください。
  • 電子レンジ染色法の加熱時間は500W使用時の目安です。機種、染色用容器、ゲルサイズ等により、加熱時間や染色の程度が異なることがありますので、予備検討を行ってください。また、電子レンジ内で溶液が沸騰しないように注意してください。

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価格表
製品名規格貯法製品番号容量価格
CBB Stain One Super(Ready To Use) SP 室温 11642-31 1 L 13,500

 ※記載の内容は、'13年3月現在の情報に基づいております。

プロテインアッセイCBB Clean Up Kit

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ナカライテスク社 プロテインアッセイCBB Clean Up Kit

本製品の使用により、CBB法において、高濃度の界面活性剤や塩類、変性剤を含む溶液のタンパク質定量が可能です。操作は簡単で、タンパク質沈殿法により、これらの妨害物質を除去でき、測定用サンプルの調製が可能です。

特長
  • わずか5分の実操作で妨害物質を除去
使用例

■SDS-PAGE用試料緩衝液に溶解しているタンパク質の定量
妨害物質である還元剤、界面活性剤を共に含む試料緩衝液中のタンパク質(BSA)を測定した結果を示します。A社除去キット使用時には、定量性が得られませんでしたが、本製品では定量性が得られており、除去効果が確認できました。

   P2-zu.gif
実施例

以下に妨害物質の例を示します。水色の列は、直接サンプルをCBB法で測定しても影響を与えない妨害物質の最大濃度を示し、紫色の列は本製品を使用した場合の最大濃度を示しています。界面活性剤、変性剤、塩類では妨害物質の影響が大幅に減少しています。
*キレート剤含有または酸性溶液(pH約5以下)の場合、中和もしくは表記載濃度まで希釈してからご使用ください。
   使用前に製品添付文書をご参照ください。

妨害物質直接 CBB法本製品使用時妨害物質直接 CBB法本製品使用時
界面活性剤 変性剤
Brij35 0.05% 7.5% Ammonium Sulfate 2M 1M
NP-40 0.05% 10% Arginine・Na 2M 2M
Octylβ-glucoside 1% 15% Guanidine・HCl 1M 6M
Octylβ-thioglucopyranoside 1% 15% Urea 4M 8M
Triton®X-100 0.1% 15% Thiourea 2M 2M
Tween®-20 0.05% 15% Buffer  
CTAB 0.005% 2% Glycine pH2.8 1M 0.1mM*
Deoxycholic Acid 0.025% 7.5% HEPES pH7.5 0.5M 1M
SDS 0.01% 2% MES pH6.1 1M 1M
CHAPS 0.5% 15% MOPS pH7.2 1M 1M
CHAPSO 0.5% 15% PBS 5X 5X
還元剤   Sodium Acetate pH5.2 0.75M 1.5M
DTT 0.5M 0.5M Sodium Bicarbonate 0.25M 0.5M
2-Mercaptoethanol 5M 1.25M TBS;Tris(25mM),NaCl(137mM) 5X 5X
TCEP pH7.6 0.25M 0.25M Tris-HCl pH8 2M 4M
Glutathione pH7 125mM 125mM その他  
キレート剤   KCl 1M 4M
EDTA 0.25M 25mM* NaCl 1.25M 5M
EGTA 0.25M 5mM* MgCl2 0.5M 4.5M
Sodium Citrate 0.25M 100mM* HCl 0.1M 10mM*
 

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参考情報

本製品を加え遠心操作を行う事で、タンパク質を沈殿させ、妨害物質を除去します。沈殿後のタンパク質にプロテインアッセイCBB溶液を直接添加する事で、定量が可能です。
尚、本製品により0.2~1.0mg/ml濃度のタンパク質溶液を沈殿できます。
*詳細は製品添付文書をご参照ください。

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価格表
製品名規格貯法製品番号容量価格
Protein Assay CBB Clean Up Kit SP 室温 11611-60 1 kit(250回) 9,300

 ※記載の内容は、'13年3月現在の情報に基づいております。

毎日の培地交換が不要 FGF2徐放ビーズ StemBeads FGF2

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StemCulture_web.gifStemBeads FGF2は、FDAで承認されている生分解性ポリマーであるPLGA [Poly(lactic-co-glycolic Acid)] にヒトFGF2を結合させたビーズで、培地中で長期にわたり一定濃度のFGF2を徐放します。お使いの培地にStemBeads FGF2を加えることで、従来は毎日必要であった培地交換が2日~3日に1回で済み休日の操作が不要で、培地使用量も節約できます。
特長
  • 培地交換は2日~3日に1回*1
  • 培地使用量を節約
  • ご利用中の培地に適用可能*2

*1細胞種、細胞密度によって培地交換の回数の調整が必要となります。
*2現時点で特定の培地に対する不具合は確認されていません。

実施例

StemBeadsで育てたiPS細胞やES細胞のコロニーは典型的な形態を示すことが実証されています。
データご提供:京都大学物質−細胞統合システム拠点 (iCeMS) 長谷川 光一講師、吉田 則子研究員

■ヒト iPS細胞株 253G1*
253G1_2.gif
 

■ヒト ES細胞株 KhES-1

KhES-1.gif

■ヒト ES細胞株 H9

H9.gif
 
性能評価1

■FGF量の変化 

FGF.gif
従来法によりFGF2を添加した場合、安定性の問題により、FGF2は激減します。StemBeadsを使用すると、3日間一定量でFGF2が徐放されます。
性能評価2

■従来法との未分化マーカーの発現量、核型解析、コロニー形態の比較

seinouhyouka-2.gif
MEFフィーダー細胞上で1ヶ月間培養したヒトES細胞のFACS解析では、本製品を添加した培地を3日に一度の培地交換により培養した細胞と従来法により培養した細胞で類似したプロファイルを示します。しかし、qRT-PCRの結果では、NANOGの発現量が著しく上昇し、分化マーカーのSOX17やBrachyuryは著しく減少しました。hESCの正常核型を増殖前に評価して、従来法または本製品使用による増殖後1ヶ月の細胞についても評価しました。その結果、いずれも、異常は確認されませんでした。免疫細胞染色では、本製品の使用と従来法を比較した結果、コロニーの形態や多能性マーカーであるOCT4、NANOGの発現量が類似していました。
性能評価3

■ 従来法とのマウス神経幹細胞における未分化状態維持の比較 

seinouhyouka-3.gif
FGF2 Beadsは、マウスの神経幹細胞について未分化状態の維持に優れることが示されています。本製品を添加した培地を用い1週間培養したマウスの神経幹細胞は、従来法やFGF2を含まない場合と比較して前駆細胞(Nestin+)の数が上昇し、神経に分化した細胞(TUJ1+)の数が減少することが示されています(Scale bars=50microns)。
ここには掲載していませんが、ヒトの神経幹細胞でも同様の結果が得られています。

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使用方法
  1. チューブの底にStemBeadsが沈んでいるため、懸濁液を再混合します。
  2. 培地1mlに対し、7.5ulのStemBeadsを混合します。
    細胞種によりますが、細胞密度は低-中程度になるようにしますと、3日間培地交換なしで培養可能となります。
    注)継代翌日に培地交換が必要なケースが多く報告されています。

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FAQ
● 培地中に徐放されるFGF2の濃度はどの程度ですか?

⇒培地1 mlに対し、7.5 µl のStemBeadsを混合した場合、FGF2の濃度は10 ng/ml です。実際のデータは前ページの性能評価1を参照ください。

● StemBeadsの細胞/コロニーへの付着が認められます。問題はありますか?

⇒StemBeadsは生分解性ポリマーのPLGA [Poly(lactic-co-glycolic Acid)]から成りますので次第になくなり、細胞に悪影響はありません。

● StemBeadsの有効期限はどれくらいですか?

⇒商品到着後、4℃保管で6ヶ月間はFGF2の活性は低下しません。

● StemBeadsはどのような細胞に適用できますか?

⇒現時点では、ヒトES細胞、ヒト iPS細胞、マウスおよびヒト神経幹細胞での適用を確認しています。基本的に、Human FGF2を必要とする細胞には適用可能と考えます。

● 培地交換の操作は?

⇒培地交換は、古い培地を除去後PBSで洗浄してから、新しい培地を加えます。

● StemBeadsの使用時は、培地が通常時よりも黄色に変色します。何か問題はありますか?

⇒培地の交換頻度が少なく済むために、pHが早く変化して黄色に変色します。このような現象が起こっても、細胞の増殖能や分化に影響は与えませんが、避ける場合には低密度で細胞を播種してください。StemBeadsは低-中程度の細胞密度に最適化されています。

● ヒトES細胞やiPS細胞の融解後、直ぐにStemBeadsを用いて培養すべきですか?

⇒融解した細胞は、より栄養を必要とするので、コロニーが形成されるまで毎日の培地交換をお勧めします。その培地交換でもStemBeadsを使用でき、コロニー形成が早くなります。

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 価格表
製品名メーカー製品番号容量価格
StemBeads FGF2 SB500 3.0 ml 56,000

 ※記載の内容は、'13年3月現在の情報に基づいております。

プロテインアッセイCBB溶液(Ready To Use)

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ナカライテスク社 プロテインアッセイCBB溶液(Ready To Use)

本製品は、使用時に希釈の手間不要なready to useタイプのタンパク質定量試薬です。

特長
  • Ready To Useタイプで操作の手間や時間を短縮
  • ランニングコストを低減
測定範囲

従来のProtein Assay CBB Solution(5x)と測定範囲は同じです

アッセイ方法スタンダード法マイクロ法
試験管 マイクロプレート 試験管 マイクロプレート
測定範囲 0.2~1.4 mg / ml  0.2~1.0 mg / ml  2.5~25μg / ml 
混合 検量線用標準液
もしくは被検液
 50μl  10μl  1 ml  150μl
CBB溶液(本品)  2.5 ml  200μl  1 ml  100μl
実施例

■マイクロプレートスタンダードアッセイ法によりBSAを定量 

  P1jisirei-grafu.gif
CBB溶液(Ready To Use)は、他社製品と同様の測定範囲を示します。

■使用量が少量

   P1jisirei-zu.gif
上図のとおり、マイクロプレートスタンダードアッセイ法では、当社製品は少ない試薬量でアッセイでき、ランニングコストを低減できます。
 

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価格表
製品名規格貯法製品番号容量価格
Protein Assay CBB Solution(Ready To Use) SP 冷蔵 11617-71 1 L 14,500

 ※記載の内容は、'13年3月現在の情報に基づいております。


LabFab News Chemicals April 2013 発行

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掲載タイトル
Ark Pharm 光学活性化合物
Apollo Scientific ふっ素化合物
Strem 鈴木―宮浦カップリング反応試薬
Strem メタセシス触媒
SiliCycle® SiliaMetS®(金属スカベンジャー)
ナカライテスク e-Nacalai Search Version構造式検索
ナカライテスク COSMOSIL® HILICカラム
ナカライテスク COSMOSIL® Cholesterカラム
LKT Laboratories 天然物
U.S. PHARMACOPEIA U.S. PHARMACOPEIA Reference Standards

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lab_47_200.jpg

LifeSensors社プロテアソーム研究用試薬

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20S、26Sプロテアソーム、COP9シグナロソーム、プロテアソーム基質

 

LSlogo-Vspot copy  090904.JPG

 

 

 

 

 

 

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20S Proteasome (Human)

Quantity: 50 μg, 0.5mg/ml
Buffer: 20 mM Tris-HCl pH 7.2, 10% Glycerol, 150 mM KCl, 1 mM β–mercaptoethanol.
Source: Human red blood cells
Storage: -80o C. Avoid repeated freeze/thaw cycles

 

 

LifeSensors proteasome1.JPG

 

 

 

20S proteasome was purified from human blood cells by DEAE chromatography follow by the ammonium sulfate precipitation (60%), Mono Q and Resource Q chromatography. Purified complex was resolved on 10% SDS polyacrylamide gel and stained with Coomassie blue.

 

 

 

 

 

 

Life Proteasome2.JPGLife Proteasome3.JPG

 

The chymotrypsin-like activity of the 20S proteasome (45μg/ml) was measured using 100μM Suc-LLVY-AMC in 20 mM HEPEs, pH 7.5, 0.5 mM EDTA, 0.05% Triton X, plus or minus 0.035% SDS

The chymotrypsin-like activity of the 20S proteasome (18 μg/ml) was measured using 100μM Suc-LLVY-AMC in 20 mM HEPEs, pH 7.5, 0.5 mM EDTA, 0.05% Triton X, plus or minus 0.5 mM MG132 (Cat. # SI9710)

Product Name Cat # Vol.
20S Proteasome (Human) PS020 50 μg (0.5mg/ml)

 

26S Proteasome (Human)

Quantity: 25μg, 50μg, 0.5mg/ml
Buffer: 20 mM Tris-HCl pH 7.2, 10% Glycerol, 150 mM KCl, 1 mM β–mercaptoethanol.
Source: Human red blood cells
Storage: -80oC. Thaw the vial on ice. Avoid repeated freeze/thaw cycles

 

 

Life Proteasome5.JPG

 

 

 

 

 

26S was purified from human blood cells by DEAE chromatography follow by the ammonium sulfate precipitation (60%), Mono Q and Resource Q chromatography. Purified complex was resolved on 10% SDS polyacrylamide gel and stained with Coomassie blue.

 

 

 

 

 

Life Proteasome6.JPGLife Proteasome7.JPG

 

The chymotrypsin-like activity of the 26S proteasome (45μg/ml) was measured using 100μM Suc-LLVY-AMC in 20 mM HEPEs, pH 7.5, 0.5 mM EDTA, 0.05% Triton X, plus or minus 0.035% SDS The chymotrypsin-like activity of the 26S proteasome (18 μg/ml) was measured using 100μM Suc-LLVY-AMC in 20 mM HEPEs, pH 7.5, 0.5 mM EDTA, 0.05% Triton X, plus or minus 0.5 mM MG132 (Cat. # SI9710)
Product Name Cat # Vol.
26S Proteasome (Human) PS026 25μg (0.5mg/ml)
50μg (0.5mg/ml)

 

 

COP9 Signalosome Complex (CSN, Human)

Quantity: 10 μg
Buffer: 20 mM Tris-HCl pH 7.2, 10% Glycerol, 150 mM KCl, 1 mM β–mercaptoethanol.
Source: Human red blood cells
Storage: -80oC. Avoid repeated freeze/thaw cycles

 

 

Life Proteasome9.JPGLife Proteasome10.JPG

 

CSN complex was purified to homogeneity from human red blood cells using DEAE, Mono Q and Resource Q chromatography. Final fraction was resolved on 10% SDS polyacrylamide gel and stained with Coomassie blue (A). This preparation retains deneddylase activity (B)

 

Product Name Cat # Vol.
COP9 Signalosome Complex (CSN, Human) CP009 10 μg

 

 

Rpn1 Protein (26S Proteasome Regulatory Subunit 1)

Quantity: 50 μg
Molecular weight: 109.5kDa
Tag: His6
Buffer: 20 mM sodium phosphate pH 7.4, 500 mM NaCl, 200 mM imidazole, 1mM β– mercaptoethanol.
Source: Yeast recombinant, expressed in E. coli. Accession number P38764.
Storage: -80oC. Avoid repeated freeze/thaw cycles

 

 

Life Proteasome4.JPG

 

 

 

 

Recombinant Rpn1 protein (Hisx6 tag) was expressed in E.coli and purified on the Ni-NTA resin using a standard protocol. 5ug of purified protein was resolved on 10% PAGE and stained with Coomassie blue.

 

 

 

 

Product Name Cat # Vol.
Rpn1 Protein (26S Proteasome Regulatory Subunit 1) PS110 50 μg

 

 

Rpn2 Protein (26S Proteasome Regulatory Subunit 2)

Quantity: 50 μg
Molecular weight: 104.2kDa
Tag: His6
Buffer: 20 mM sodium phosphate pH 7.4, 500 mM NaCl, 200 mM imidazole, 1mM β– mercaptoethanol.
Source: Yeast recombinant, expressed in E. coli. Accession number P32565.
Storage: -80oC. Avoid repeated freeze/thaw cycles

 

Life Proteasome8.JPG

 

 

 

Recombinant Rpn2 protein (Hisx6 tag) was expressed in E.coli and purified on the Ni-NTA resin using a standard protocol. 5ug of purified protein was resolved on 10% PAGE and stained with Coomassie blue.

 

 

 

 

 

Product Name Cat # Vol.
Rpn2 Protein (26S Proteasome Regulatory Subunit 2) PS120 50 μg

 

 

Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC (Suc-LLVY-AMC), Proteasome Substrate

Quantity: 5mg
Molecular weight: 763.9
Formula: C40H53N5O10
State: Lyophilized powder
Purity: >98% by TLC
Solubility: DMSO at least 5mM. Concentration range 10-100μM.
Storage: Dry reagent at 4oC; Store DMSO stock at -20oC. Avoid repeated freeze/thaw cycles

Formula:

 

Life Proteasome11.JPG

 

 

 

 

 

 

 

 

Product Name Cat # Vol.
Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC (Suc-LLVY-AMC), Proteasome Substrate PS500 5mg

 

 

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InvivoGen社細胞商品輸送条件変更のお知らせ

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平素はInvivoGen社商品のご愛顧を賜り厚くお礼申し上げます。
さて、この度InvivoGen社細胞商品について品質安定のため、輸送条件が凍結状態での輸送に変更されますので、お知らせします。
現在の細胞を休眠状態にしたうえでの室温輸送から、凍結状態、ドライアイス梱包での輸送に変更します。

 

実施日

2013年3月15日(金) InvivoGen社出荷分より

 

変更目的

品質安定のため

 

変更内容

細胞を休眠状態にしたうえでの室温輸送
  ↓
細胞を凍結状態、ドライアイス梱包での輸送

 

取扱上の注意

当該商品がお手元に到着次第、直ぐに細胞培養をお願いします。

 

Invivo1303.jpg

 

対象商品
商品名メーカー製品番号
293/hMD2-CD14 293-hmd2cd14
293/hNOD1 293-hnod1
293/hNOD2 293-hnod2
293/hTLR1-HA 293-htlr1ha
293/hTLR2 293-htlr2
293/hTLR2-TLR6 293-htlr2/6
293/hTLR2-CD14 293-htlr2cd14
293/hTLR2-HA 293-htlr2ha
293/hTLR3 293-htlr3
293/hTLR3-HA 293-htlr3ha
293/hTLR4A 293-htlr4a
293/hTLR4-HA 293-htlr4ha
293/hTLR4A-MD2-CD14 293-htlr4md2cd14
293/hTLR5 293-htlr5
293/hTLR5-CD14 293-htlr5cd14
293/hTLR5-HA 293-htlr5ha
293/hTLR6-HA 293-htlr6ha
293/hTLR10-HA 293-htlr10ha
293/LacZ 293-lacz
293/mNOD1 293-mnod1
293/mNOD2 293-mnod2
293/mTLR1 293-mtlr1
293/mTLR1-TLR2 293-mtlr1/2
293/mTLR2 293-mtlr2
293/mTLR2-TLR6 293-mtlr2/6
293/mTLR3 293-mtlr3
293/mTLR4 293-mtlr4
293/mTLR4-MD2-CD14 293-mtlr4md2cd14
293/mTLR5 293-mtlr5
293/mTLR6 293-mtlr6
293/mTLR9 293-mtlr9
293/null 293-null
293XL/hTLR7 293xl-htlr7
293XL/hTLR7-HA 293xl-htlr7ha
293XL/hTLR8 293xl-htlr8
293XL/hTLR8-HA 293xl-htlr8ha
293XL/hTLR9 293xl-htlr9
293XL/hTLR9-HA 293xl-htlr9ha
293XL/mTLR7 293xl-mtlr7
293XL/null 293xl-null
HEK-Blue™ CD40L cells hkb-cd40
HEK-Blue™ CD40L kit hkb-cd40-kit
HEK-Blue™ hMD2-CD14 cells hkb-hmdcd
HEK-Blue™ hNOD1 cells hkb-hnod1
HEK-Blue™ hNOD2 cells hkb-hnod2
HEK-Blue™ hTLR2 cells hkb-htlr2
HEK-Blue™ hTLR3 cells hkb-htlr3
HEK-Blue™ hTLR4 cells hkb-htlr4
HEK-Blue™ hTLR5 cells hkb-htlr5
HEK-Blue™ hTLR7 cells hkb-htlr7
HEK-Blue™ hTLR8 cells hkb-htlr8
HEK-Blue™ hTLR9 cells hkb-htlr9
HEK-Blue™ IFN-α/β cells hkb-ifnab
HEK-Blue™ IFN-γ cells hkb-ifng
HEK-Blue™ IL-18/1L-1β cells hkb-il18
HEK-Blue™ IL-18/IL-1β kit hkb-il18-kit
HEK-Blue™ IL-1β cells hkb-il1b
HEK-Blue™ IL-1β kit hkb-il1b-kit
HEK-Blue™ IL-33/IL-1β cells hkb-il33
HEK-Blue™ IL-6 cells hkb-il6
HEK-Blue™ IL-6 kit hkb-il6-kit
HEK-Blue™ mNOD1 cells hkb-mnod1
HEK-Blue™ mNOD2 cells hkb-mnod2
HEK-Blue™ mTLR2 cells hkb-mtlr2
HEK-Blue™ mTLR3 cells hkb-mtlr3
HEK-Blue™ mTLR4 cells hkb-mtlr4
HEK-Blue™ mTLR5 cells hkb-mtlr5
HEK-Blue™ mTLR7 cells hkb-mtlr7
HEK-Blue™ mTLR8 cells hkb-mtlr8
HEK-Blue™ mTLR9 cells hkb-mtlr9
HEK-Blue™ Null1 cells hkb-null1
HEK-Blue™ Null1-k cells hkb-null1k
HEK-Blue™ Null1-v cells hkb-null1v
HEK-Blue™ Null2 cells hkb-null2
HEK-Blue™ Null2-k cells hkb-null2k
HEK-Blue™ IL-4/IL-13 cells hkb-stat6
HEK-Blue™ IL-4/IL-13 kit hkb-stat6-kit
HEK-Blue™ TGF-β cells hkb-tgfb
HEK-Blue TGF-β kit hkb-tgfb-kit
HEK-Blue™ TNF-α/IL-1β cells hkb-tnfil1
HEK-Blue™TNF-α/IL-1β kit hkb-tnfil1-kit
HEK-Dual™ IFN-γ cells hkd-ifng
HEK-Dual TNFα cells hkd-tnfa
Jurkat-Dual™ cells jktd-isnf
C3H/TLR4mut MEF mef-c3h4m
C3H/WT MEF mef-c3hwt
C57/WT MEF mef-c57wt
RAW-Blue™ ISG cells raw-isg
RAW-Lucia™ ISG Cells rawl-isg
RAW-Blue™ cells raw-sp
PlasmoTest™ rep-pt1
PlasmoTest™ rep-pt2
Ramos-Blue™-defMyD cells rms-dmyd
Ramos-Blue™ cells rms-sp
THP1-defASC thp-dasc
THP1-Dual™ Cells thpd-nfis
THP1-defNLRP3 thp-dnlp
THP1-Blue™ ISG Cells thp-isg
THP1-Lucia™ ISG Cells thpl-isg
THP1-Lucia™ Cells thpl-nfkb
THP1-Blue™ NF-κB Cells thp-nfkb
THP1-Null thp-null
THP1 -XBlue™-CD14 cells thpx-cd14sp
THP1-XBlue™-defMyD cells thpx-dmyd
THP1 -XBlue™-MD2-CD14 cells thpx-mdcdsp
THP1-XBlue™ cells thpx-sp

 

PBL InterferonSource社 VeriKine-HS™ IFN-β 血清 ELISA Kit

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超高感度!微量サンプルでも測定可能

 

pbl-web_logo.png

 

 

 

 

 

 

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VeriKine-HSTM Human Interferon Beta Serum ELISA Kit

 

• Allows accurate Human IFN-β measurement to as low as 1.2 pg/ml

• Compatibles with human serum, plasma, autoimmune disease sera, or cell culture media

• Provides high precision assay reproducibility with < 8% inter-assay CV

• Suitable for measurement of trademarked therapeutic molecules in human serum samples

 

 

 

Interferon beta (IFN-β) has long been known to function as an inhibitor of viral
replication as part of body’s innate antiviral response. It is also widely used as a
treatment for Multiple Sclerosis (MS) patients, either as a single agent or as part of a
combinatorial approach. With the resurgence of interest in antitumor immunity as a
promising treatment approach for several types of cancers, there has been renewed
focus on applying IFN-β as a therapy due to the anti-tumor and immunomodulatory
properties of the protein. In addition, ligation of Toll-Like Receptors (TLRs)
leads to IFN-β production and, as novel TLR agonists and antagonists are being
developed as therapeutics for several diseases, it may be useful to monitor IFN-β
level as a downstream readout for compound effectiveness.

The VeriKine-HSTM Human Interferon Beta Serum ELISA kit has been developed
to measure low or basal levels of human IFN-β in serum, plasma or tissue culture
media samples. This assay is also suitable for measurement of trademarked IFN-β
therapeutic compounds in human serum. Researchers and clinical investigators
examining a) the pharmacokinetics of IFN-β molecules, b) IFN-β as a biomarker,
or c) IFN-β as a pharmacodynamic marker of TLR agent or other immune response modifier activity will find this highly sensitive and specific assay to be an essential laboratory tool.

 

 

 

 

Dose Response in Normal Human Serum Spiked with 0, 1, 3, and 10 U/ml IFN-β

pbl graph1.png

 

 

 

Correlation between ELISA Standard Curves prepared in Standard Diluent and Normal Human Serum

 pbl graph3.png

  

 

  pbl graph4.png

 

 

                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                        
Catalog Number
Description Package Size
41415-1 VeriKine-HSTM Human Interferon Beta Serum ELISA Kit
Compatibility: human serum, plasma, cell culture media plate
Assay range: 1.2-150 pg/ml
1 x 96-stripwell

 

Kit Speci!cations:
• Assay range: 1.2-150 pg/ml
• Format: 96-stripwell plate
• Sample volume: 50 μl per well
• Detection: colorimetric
• Assay time: 3 hours
• Compatibility: human serum, plasma, or cell culture media
• Speci!city: human IFN-β. Does not cross-react with human IFN-α,
IFN-γ, IFN-ω, IL-6; no cross-reactivity with mouse IFN-α, IFN-β or Rat IFN-β

 

Kit Components:
• Precoated 96-stripwell plate
• Plate sealer
• Recombinant human IFN-β standard
• Wash solution concentration
• Standard diluent
• Sample buller
• Antibody concentrate
• HRP conjugate concentrate
• Assay diluent
• TMB substract solution
• Stop solution

 

 

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トリアゾール結合型HILIC カラム(LabFab Chemicals 2013 April)

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コスモシールHILIC は、トリアゾールを結合させることにより親水性相互作用に加えて陰イオン交換能を有し
ます。この親水性相互作用と陰イオン交換能によりユニークな保持挙動や分離能を示します。

記事は

こちら→pdf.gif

(179KB)

 

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