ProQinase社キナーゼアッセイサービス取り扱い開始（受託サービス）

April 24, 2016, 8:51 pm

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Cloud-Clone社クーポン添付キャンペーン

April 25, 2016, 10:44 pm

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クーポン添付期間： ～2016年10月11日（火）

内容： Cloud-Clone社のELISAキット一つ購入につき、もれなくクーポン券一枚が付いてきます。

 

 

抗体もしくはリコンビナントタンパク質から2商品を選び、価格の安い方を無償で提供します。購入時、クーポン券に記載されている6桁の英数字をナカライテスク営業担当もしくは弊社販売代理店までお伝えください。

※クーポンの使用は1回限りです

Tocris社　2016年4月新製品

May 2, 2016, 4:00 am

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New products are an essential component of our range. Introductions are made on an ongoing basis, with hundreds of new small molecules, peptides and antibodies being added every year. Our aim is to find the latest, otherwise unobtainable research tools, and bring them to the market as quickly as we can.

 

Cat.No.	Product Name	Activity
5901	c-Di-AMP sodium salt	STING and DDX41 ligand; activates STING-dependent signaling
5871	pCPA methyl ester hydrochloride	Tryptophan hydroxylase inhibitor
5859	Neuropeptide S (Rat)	Potent endogenous neuropeptide S receptor agonist
5858	Droperidol	D2 receptor antagonist
5853	JNJ DGAT2-A	DGAT2 inhibitor
5848	NoxA1ds	Potent and selective NADPH oxidase 1 (NOX1) inhibitor
5845	JX 06	Potent and selective PDK1/2/3 inhibitor
5811	NBD 556	CD4 mimetic; blocks HIV-1 cell entry
5795	ATI 2341	CXCR4 allosteric agonist
5725	ML 352 hydrochloride	High affinity and selective presynaptic choline transporter (CHT) inhibitor
5365	LLY 507	Potent and selective SMYD2 inhibitor
5067	MRT 68601 hydrochloride	Potent TBK1 inhibitor
2587	Neuropeptide S (human)	Potent endogenous neuropeptide S receptor agonist
5900	c-Di-GMP sodium salt	STING and DDX41 ligand; activates STING-dependent signaling
5836	CBR 5884	3-Phosphoglycerate dehydrogenase (PHGDH) inhibitor
5825	CHAPSO	Zwitterionic detergent
5737	BAM 15	Mitochondrial protonophore uncoupler
5351	PQ 69	Potent and selective A1 antagonist/inverse agonist
5810	RS 1	High affinity RAD51 activator; also CRISPR enhancer
5740	6-Hydroxy-DL-DOPA	Allosteric inhibitor of RAD52; also APE1 inhibitor
5699	IP7e	Potent Nurr1 activator
5801	PF CBP1	Selective CBP/p300 bromodomain inhibitor

 

 

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原子吸光分析関連試薬

May 2, 2016, 12:16 am

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原子吸光分析関連試薬

原子吸光分析法は操作が簡単、高感度、共存成分による妨害が少ないなど数多くの特長があり、医学、理学、工学、農学、薬学、その他公害関連などの諸分野で広く用いられています。

 

 

• 前処理用試薬
• キレート試薬
• マスキング試薬
• 抽出用試薬
• 干渉抑制試薬
• 関連試薬
• 1,000ppm標準液
• 100ppm標準液

 

 

■前処理用試薬

製品名	規格	製品番号	容量	オンライン カタログへ
Acetic Acid	UF 精密分析用	00224-35	500 ml
Hydrochloric Acid(35%)*	UF 精密分析用	18402-45	500 ml
Hydroxyl Ammonium Chloride*	SP 有害金属測定用	18724-64	100 g
Nitric Acid(S.G.=1.38, 60%)*	UF 精密分析用	24417-75	500 ml
Perchloric Acid(60%)	UF 精密分析用	26508-25	500 g
Sulfuric Acid*	UF 精密分析用	32528-75	500 g
Tin(Ⅱ) Chloride Dihydrate*	SP 有害金属測定用	34032-24	100 g
Zinc Powder	SP 有害金属測定用	36936-34	250 g

*劇物

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■キレート試薬

製品名	規格	製品番号	容量	オンライン カタログへ
Sodium N,N-Diethyldithiocarbamate Trihydrate	SP 原子吸光分析用	12113-02	25 g
Dithizone	GR JIS試薬特級	13916-04	5 g
Pyrrolidinecarbodithioic Acid Ammonium Salt	SP 原子吸光分析用	29717-11	1 g
		29717-24	5 g
		29717-82	25 g

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■マスキング試薬

製品名	規格	製品番号	容量	オンライン カタログへ
Ethylenediaminetetraacetic Acid	GR	15105-22	25 g
		15105-35	500 g
di-Ammonium Hydrogen Citrate	SP 原子吸光分析用	02530-55	500 g

▲戻る

 

■抽出用試薬

製品名	規格	製品番号	容量	オンライン カタログへ
Butyl Acetate 〔n-Butyl Acetate〕	SP 原子吸光分析用	06008-95	500 ml
Chloroform*	UF 精密分析用	08415-95	500 ml
Ethanol(99.5)	UF 精密分析用	14722-75	500 ml
4-Methyl-2-pentanone 〔Methyl Isobutyl Ketone〕	SP 原子吸光分析用	22202-35	500 ml
		22202-93	3 L

*劇物

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■干渉抑制試薬

製品名	規格	製品番号	容量	オンライン カタログへ
Strontium Chloride Hexahydrate	SP 原子吸光分析用	32336-14	100 g

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■関連試薬

製品名	規格	製品番号	容量	オンライン カタログへ
Hydrochloric Acid(35%)*	SP 有害金属測定用	18429-15	500 ml
Nitric Acid(S.G.=1.38, 60%)*	SP 有害金属測定用	24430-85	500 ml
Perchloric Acid(60%)	SP 有害金属測定用	26519-85	500 g
Sulfuric Acid*	SP 有害金属測定用	32536-65	500 g

*劇物

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■1,000ppm標準溶液

製品名	溶質	液性	製品 番号	容量	オンライン カタログへ
Aluminium Standard Solution	Al	1mol/l-HCl	37506-34	100 ml
Antimony Standard Solution*	SbCl3	2.75mol/l-HCl	37526-74	100 ml
Arsenic Standard Solution**	As2O3	NaOH・HCl(pH3～6)	37519-74	100 ml
Barium Standard Solution	BaCl2	1mol/l-HCl	37528-54	100 ml
Bismuth Standard Solution	Bi(NO3)3	0.75mol/l-HNO3	37533-74	100 ml
Boron Standard Solution	H3BO3	H2O	37503-64	100 ml
Cadmium Standard Solution	Cd	0.1mol/l-HNO3	37524-94	100 ml
Calcium Standard Solution	CaCO3	1mol/l-HCl	37509-04	100 ml
Chromium Standard Solution*	K2Cr2O7	0.015mol/l-HNO3	37512-44	100 ml
Cobalt Standard Solution	Co	0.1mol/l-HNO3	37515-14	100 ml
Copper Standard Solution	CuSO4	0.1mol/l-HNO3	37517-94	100 ml
Gold Standard Solution	Au	1mol/l-HCl	37530-04	100 ml
Iron Standard Solution	Fe(NO3)3	0.275mol/l-HNO3	37514-24	100 ml
Lead Standard Solution	Pb(NO3)2	0.1mol/l-HNO3	37532-84	100 ml
Lithium Standard Solution	Li2CO3	0.1mol/l-HCl	37501-84	100 ml
Magnesium Standard Solution	MgCl2	1mol/l-HCl	37505-44	100 ml
Manganese Standard Solution	MnCl2	0.1mol/l-HNO3	37513-34	100 ml
Mercury Standard Solution**	HgCl2	H2O	37531-94	100 ml
Molybdenum Standard Solution	(NH4)6 Mo7O24	0.075mol/l-NH4OH	37521-24	100 ml
Nickel Standard Solution	Ni	0.1mol/l-HNO3	37516-04	100 ml
Palladium Standard Solution	PdCl2	1mol/l-HCl	37522-14	100 ml
Platinum Standard Solution	Pt	1mol/l-HCl	37529-44	100 ml
Potassium Standard Solution	KCl	H2O	37508-14	100 ml
Selenium Standard Solution**	Se	1mol/l-HCl	37534-64	100 ml
Silicon Standard Solution	SiO2	0.3mol/l-Na2CO3	37507-24	100 ml
Silver Standard Solution	AgNO3	0.1mol/l-HNO3	37523-04	100 ml
Sodium Standard Solution	NaCl	H2O	37504-54	100 ml
Strontium Standard Solution	SrCO3	0.15mol/l-HCl	37520-34	100 ml
Tellurium Standard Solution*	Te	6mol/l-HCl	37527-64	100 ml
Tin Standard Solution*	Sn	6mol/l-HCl	37525-84	100 ml
Titanium Standard Solution*	TiO2	1.25mol/l-H2SO4	37510-64	100 ml
Tungsten Standard Solution	Na2WO4	H2O	37535-54	100 ml
Vanadium Standard Solution*	NH4VO3	0.5mol/l-H2SO4	37511-54	100 ml
Zinc Standard Solution	Zn(NO3)2	0.1mol/l-HNO3	37518-84	100 ml

**毒物　　*劇物

 

<ご注意>
・測定濃度をラベルに表示しております。
・直射日光を避け、冷暗所に保存してください。
・一度取り出した液は元にもどさないでください。
・器具類は清浄なものをご使用ください。
・希釈した状態で長期間保存しますと変質を起こすことがあります。
・できる限り新しく調製したものをご使用ください。

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■100ppm標準溶液

製品名	溶質	液性	製品 番号	容量	オンライン カタログへ
Arsenic Standard Solution**	As2O3	NaOH・HCl(pH3～6)	37537-34	100 ml
Cadmium Standard Solution	Cd	0.1mol/l-HNO3	37539-14	100 ml
Chromium Standard Solution*	K2Cr2O7	0.015mol/l-HNO3	37540-74	100 ml
Cobalt Standard Solution	Co	0.1mol/l-HNO3	37541-64	100 ml
Copper Standard Solution	CuSO4	0.1mol/l-HNO3	37548-94	100 ml
Iron Standard Solution	Fe(NO3)3	0.275mol/l-HNO3	37549-84	100 ml
Lead Standard Solution	Pb(NO3)2	0.1mol/l-HNO3	37550-44	100 ml
Manganese Standard Solution	MnCl2	0.1mol/l-HNO3	37545-24	100 ml
Nickel Standard Solution	Ni	0.1mol/l-HNO3	37546-14	100 ml
Zinc Standard Solution	Zn(NO3)2	0.1mol/l-HNO3	37547-04	100 ml

**毒物　　*劇物

 

<ご注意>
・測定濃度をラベルに表示しております。
・直射日光を避け、冷暗所に保存してください。
・一度取り出した液は元にもどさないでください。
・器具類は清浄なものをご使用ください。
・希釈した状態で長期間保存しますと変質を起こすことがあります。
・できる限り新しく調製したものをご使用ください。

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※記載の内容は、'16年5月現在の情報に基づいております。

 

Tocris社　2016年5月新製品

May 18, 2016, 4:00 am

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Cat.No.	Product Name	Activity
5830	K-(D-1-Nal)-FwLL-NH2	High affinity and potent ghrelin receptor inverse agonist
5808	ISOX INACT	Negative control for PF-CBP1 (Cat. No. 5801)
5327	BGC 20-1531 hydrochloride	High affinity and selective EP4 antagonist
5904	Montelukast sodium	CysLT1 antagonist
5902	Tiotropium bromide	Potent muscarinic receptor antagonist
5864	Tolcapone	COMT inhibitor; also inhibits transthyretin aggregation
5854	SR 9238	Potent and selective LXR inverse agonist
5832	TGX 221	Potent and selective PI 3-kinase β inhibitor
5817	BSI 201	PARP-1 inhibitor
5754	PF 543 hydrochloride	Potent and selective SphK1 inhibitor
5714	S 2101	LSD1 inhibitor

 

 

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InvivoGen社　ゲルダナマイシン・ゲルダナマイシンアナログ

May 18, 2016, 9:07 pm

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InvivoGen社
ゲルダナマイシン・ゲルダナマイシンアナログ

ゲルダナマイシンは、ベンゾキノンアンサマイシン系の抗生物質で、Heat shock protein 90（Hsp90）の作用を阻害しHsp90クライアントタンパク質の分解へと導きます。これらのクライアントタンパク質の多くは発がんタンパク質であることから、ゲルダナマイシンはがん細胞の増殖を抑制し、実験動物において抗がん作用を示します。しかしながら、水溶性が低く肝臓への毒性が高いことが問題視されています。これらの問題点を改善するために、17位のみが異なる多種のゲルダナマイシンアナログが合成されています。

 

 

 

価格表

製品名	説明	メーカー 製品番号	容量	オンライン カタログへ
Geldanamycin	GA - HSP90 Inhibitor	ant-gl-5	5 mg
		ant-gl-25	25 mg
17-AAG	Geldanamycin Analog - Less Toxic and More Stable	ant-agl-5	5 mg
		ant-agl-25	25 mg
17-DMAG	Geldanamycin Analog - Water-Soluble	ant-dgl-5	5 mg
		ant-dgl-25	25 mg
17-GMB-APA-GA	Geldanamycin Analog for Conjugation to a Monoclonal Antibody	gmbapa-ga	1 mg
17-NHS-ALA-GA	Geldanamycin Analog for Coupling of NH2-Containing Molecules	ant-nhgl-1	1 mg
FITC-Geldanamycin	FITC-labeled geldanamycin	ant-fgl-1	1 mg
		ant-fgl-5	5 mg

※記載の内容は、'16年3月現在の情報に基づいております。

 

LabFab News Vol.14 June 発行

May 25, 2016, 7:35 pm

≫ Next: LifeSensors 2015-2016日本語版カタログ発刊記念キャンペーン

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掲載内容

各ページのPDFをご覧になれます。

CRISPRゲノム編集促進化合物    （PDF 132KB） Tocris
CRISPRは遺伝子の編集や制御を標的にした技術で、さまざまな生物システムに応用されています。Tocris社は、CRISPRによるゲノム編集の効率を促進する低分子を提供しています。
幹細胞用DNAトランスフェクション試薬    （PDF 372KB） MTI-GlobalStem
MTI-GlobalStem社から幹細胞に高効率かつ低毒性でDNAを導入できるトランスフェクション試薬を紹介します。
ユビキチンELISA キット    （PDF 162KB） LifeSensors
本製品は、LifeSensors社独自のユビキチン結合試薬が、マイクロプレートのウェル上にコートされたサンドイッチELISAキットです。結合しなかったタンパク質の洗浄後に加える抗体は抗ユビキチンモノクローナル抗体（一次抗体：VU-2）です。余剰のVU-2を除去後、HRP標識二次抗体で検出します。
mTOR & カルシニューリンシグナル伝達阻害剤    （PDF 211KB） InvivoGen
哺乳類ラパマイシン標的タンパク質（mTOR）は、タンパク質の合成、細胞増殖、オートファジーを主に調節します。mTORは多くの疾病に関与しており、抗がん剤のデザインにおけるターゲットです。カルシニューリンはT細胞の活性化に関与しています。カルシニューリンはカルシウムイオンやカルモジュリン依存性のセリン/トレオニンホスファターゼで、IL-2の発現を通じてT細胞応答を刺激するNFAT転写因子を活性化します。InvivoGen社ではmTORの活性化やカルシニューリンによるシグナル伝達をブロックする阻害剤を販売しています。
高収量・高品質のDNA精製が可能 糞便からのDNA精製キット    （PDF 184KB） Norgen Biotek
本製品は新鮮または凍結保存した糞便から迅速・簡便にDNAを精製可能な製品です。本製品により、糞便中のさまざまな微生物や宿主の細胞由来のDNAを精製できます。
ビオチン化CD19/CD3    （PDF 148KB） ACROBiosystems
FDAが承認したBlinatumomabは、急性リンパ性白血病のブレイクスルーとなった新しい免疫療法剤です。このバイスペシフィック抗体は、CD3を発現するT細胞に結合し、CD19を発現している白血病の細胞を含むB細胞を攻撃します。ACROBiosystems社は、ビオチン化CD19やCD3など、さまざまなCDタンパク質を提供しています。
上皮間葉転換マーカー抗体    （PDF 153KB） Atlas Antibodies
Atlas Antibodies社の上皮間葉転換マーカー抗体は、上皮間葉転換でキーとなるタンパク質をターゲットとしたマウスモノクローナル抗体から構成されています。抗体はウェスタンブロッティング解析や、ヒトの正常およびがん組織を用いた免疫組織染色などにより厳密に評価しています。
さまざまな研究対象の抗体がさらに充実 モノクローナル抗体　新製品    （PDF 142KB） Santa Cruz
Santa Cruz社では、合成と分解、細胞周期タンパク質、転写因子などさまざまな研究対象の抗体に、新しくラインアップを追加しました。今回はその中から、一部の製品を紹介します。
DNAラダーマーカー    （PDF 153KB） ナカライテスク
DNA Ladder Oneはローディングダイがプレミックスされているready to useのDNAラダーマーカーです。範囲の異なるブロードレンジ、100bp、1kbpの3種類のマーカーを用意しています。
ビタミンD と代謝物の一斉分析可能 COSMOCORE 2.6Cholester    （PDF 380KB） ナカライテスク
ビタミンDは、骨疾患をはじめさまざまな疾患と関わっています。ビタミンの分析には、ビタミンD2やD3、その代謝物である25-ヒドロキシビタミンD、ジアステレオマーであるC3-エピマー体を一斉に分析する必要があります。汎用的に使用されるC18カラムでは分離不十分な場合がありますが、コスモコア2.6Cholesterを用いることによりビタミンD代謝物を一斉に分析することが可能です。

全ページ分のPDFはこちら

 

 

 

LifeSensors 2015-2016日本語版カタログ発刊記念キャンペーン

May 31, 2016, 4:00 am

≫ Next: 水分指示薬付　モレキュラーシーブ3A・4A

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LifeSensors 2015-2016日本語版カタログの発刊を記念して、LifeSensors全製品を特別価格で提供します。

この機会にぜひご利用ください。

 

期間：2016年6月1日（水）～2016年8月31日（水）

内容：希望納入価格の最大 30％OFF

 

▸キャンペーンフライヤーPDF（2.88MB）

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水分指示薬付　モレキュラーシーブ3A・4A

June 7, 2016, 1:12 am

≫ Next: Atlas Antibodies社全製品対象　組織・細胞用固定液4% PFA 添付キャンペーン

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水分指示薬付
モレキュラーシーブ3A・4A

モレキュラーシーブは細孔をもつ多孔性の合成ゼオライトで、細孔径の大きさによって選択的に分子を吸着します。この性質から、モレキュラーシーブは有機溶媒中の水分除去、ガスの乾燥剤などに広く使用されています。本品は脱水用として有効な3Å、4Åの細孔径をもつモレキュラーシーブに、水分が吸着すると変色する指示薬を担持させた製品です。

 

 

 

特長

• 水分吸着によって、青→赤紫→茶に変色
• 指示薬がほどんど溶出しない
• 五酸化りんに次ぐ高い吸湿力
• ビーズ状（Φ2mm）のため微粉末が出にくい

 

 

データ

■指示薬溶出の有無 

溶出しない溶媒	溶出する恐れのある溶媒
アセトン トルエン アセトニトリル ハロゲン化炭化水素 1価アルコール DMA（N,N'-ジメチルアセトアミド） 多価アルコール DMF（N,N'-ジメチルホルムアミド） ベンゼン DMSO（ジメチルスルホキシド） 1,4-ジオキサン THF（テトラヒドロフラン） ピリジン	酢酸 HMPA（ヘキサメチルホスホアミド）

 

■水分吸着と色の変化図

99.5v/v%のテトラヒドロフラン50mlに4Aタイプ2gを添加したときの水分減少と変色の様子

 

■等温での水の吸着量比較

 

 

使用方法

本品の乾燥能力は最大20%です。例えば、水分含量0.5%の有機溶媒1Lの乾燥には、本品が50g必要です。

静置法	有機溶媒に本品を加え、時々攪拌しながら24時間放置します。
カラム法	本品をカラムに充填し（25×600mmのカラムに本品を250g程度充填）、乾燥したい溶媒を2～3L/hrの流速で流します（この時初流250mlは除去します）。この方法は静置法より強力で時間も要しません。ただし、水分含量の多い溶媒や極性溶媒などの乾燥しにくい溶媒に対しては、前もって静置法を行うとより髙い効果が得られます。

 

再生方法

使用したモレキュラーシーブを多量の水、またはエタノールで洗浄した後、水で数回洗浄して付着した溶媒を除去します。次に200～250℃で乾燥します。この場合3～5%の水が残りますが、通常の使用に差し支えありません。

さらに厳密な乾燥を必要とする場合や、乾燥しにくい極性溶媒などに用いる際は、乾燥ガス気流下、または真空中（10^-1～10^-3mmHg）で、300～350℃に加熱し、完全に乾燥します。

 

 

種類と用途

使用条件に合わせて、3Aと4Aの2種類を用意しています。

タイプ	3A	4A
吸着される 分子	有効直径3Å以下の分子 （H2O、NH3、Heなど）	有効直径4Å以下の分子 （C2H5OH、C2H6、C3H6、C4H6、CO2、H2Sなど）
吸着されない 分子	有効直径3Å以上の分子 （C2H5OH、CH4、CO2、C2H2、H2S、O2、C2H4など）	有効直径4Å以上の分子 （C3H8、環状炭化水素など）
主な用途	小さな分子の極性溶媒の乾燥 （メタノール、エタノール、アセトン、アセトニトリルなど） ガスの乾燥（エチレン、ブタジエン、アンモニア、二酸化炭素など）	一般の有機溶媒の乾燥（3Aよりも乾燥能力大）（ベンゼン、四塩化炭素、クロロホルム、トルエンなど） ガスの乾燥（天然ガスなど）

 

 

価格表

製品名	製品番号	容量	オンライン カタログへ
Molecular Sieves 3A, with indicator	23355-44	250 g
Molecular Sieves 3A, mixed indicator	23356-05	500 g
Molecular Sieves 4A, with indicator	23357-24	250 g
Molecular Sieves 4A, mixed indicator	23358-85	500 g

製造元：マナック株式会社

 

※記載の内容は、'04年4月現在の情報に基づいております。 

 

 

Atlas Antibodies社全製品対象　組織・細胞用固定液4% PFA 添付キャンペーン

June 12, 2016, 4:00 am

≫ Next: Bio X Cell社　高品質モノクローナル抗体

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免疫組織染色のデータが豊富なAtlas Antibodies 社製品について、キャンペーンを実施します。同社抗体および関連製品を購入いただいたお客様に、組織・細胞用固定液の4%- パラホルムアルデヒド・りん酸緩衝液（4% PFA）を添付します。

 

期間：2016年6月13日（月）～2016年8月31日（水）

内容：Atlas Antibodies社対象製品1 個購入につき、4% PFA（5×10ml）を添付

 

▸Atlas_キャンペーンフライヤーPDF（1.8MB）

Bio X Cell社　高品質モノクローナル抗体

June 5, 2016, 11:04 pm

≫ Next: Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit

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Bio X Cell社
高品質モノクローナル抗体

 

 

 

Bio X Cell社は、高品質なモノクローナル抗体をバルクサイズで提供しているメーカーです。抗体は高純度、低エンドトキシンで、また保存剤や安定剤が添加されていないためin vivo試験や前臨床試験に最適です。

 

 

 

特長

• In vivo試験に最適
• バルク容量で提供

 

 

 

製品ラインアップ

• 高品質抗体　InVivoMab™

高純度、低エンドトキシンで、保存剤や安定剤を含まない

容量：5mg、25mg、50mg、100mg

 

• 超高品質抗体　InVivoPlus™

InVivoMab™よりも厳しい基準を満たした超高品質抗体

容量：5mg、25mg、50mg、100mg

 

• 抗タグ抗体　ReadyTag™

容量：1mg、5mg、10mg、25mg

 

 

 ■InVivoMab™とInVivoPlus™の比較

	InVivoMab™	InVivoPlus™
純度	>95%	>95%
Protein Integrity	SDS-PAGEで確認	SDS-PAGEで確認
エンドトキシン	<2EU/mg	<1EU/mg
活性	試験なし	フローサイトメトリーもしくはELISAにより確認済み
タンパク質凝集体 含有量	試験なし	光散乱解析：<5% の凝集
マウス病原体	試験なし	マウス病原体フリー
保存剤（azide）	無添加	無添加
In vivo適正	適している	適している

 

 

使用例

■InVivoPlus™抗マウスPD-L1抗体（ウェスタンブロッティング）

レーン1 ：0.1μg のC末端にHisタグを付加したマウスPD-L1（還元精製）
レーン2 ：0.05μgのC末端にHisタグを付加したマウスPD-L1（還元精製）
レーン3 ：0.025μgのC末端にHisタグを付加したマウスPD-L1（還元精製）

一次抗体 ：Anti-Mouse PD-L1 Antibody［10F.9G2］（#BP0101）（8μg/ml）
二次抗体 ：HRP labeled Goat Anti-Rat（1,000倍希釈） 

 

 

 

製品一覧 

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■InVivoMab™

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抗原	クローン	アイソタイプ	メーカー 製品番号
mouse 2C TCR	1B2	Mouse IgG1	BE0069
mouse 3-83 Ig	54.1	Rat IgG kappa	BE0142
mouse 4-1BB (CD137)	LOB12.3	Rat IgG2a	BE0169
mouse 4-1BBL (CD137L)	TKS-1	Rat IgG2a	BE0110
human/rat/fish AChR	Mab35/TIB-175	Rat IgG1	BE0123
mouse B7-1 (CD80)	1G10	Rat IgG2a	BE0134
mouse B7-H3	MJ18	Rat IgG1	BE0124
mouse B220	RA3.3A1/6.1	Rat IgM	BE0067
mouse BTLA (CD272)	6A6	Armenian Hamster IgG	BE0132
mouse BTLA (CD272)	PJ196	Mouse IgG1	BE0196
mouse BTLA (CD272)	8F4	Mouse IgG1	BE0210
mouse BTLA (CD272)	PK18.6	Rat IgG1k	BE0153
human Cadherin 11	23C6	Mouse IgG1	BE0221
human/mouse, rat CCL2 (MCP-1)	2H5	Armenian Hamster IgG	BE0185
human CD1a	OKT-6	Mouse IgG1	BE0211
mouse CD1d	20H2 (HB323)	Rat IgG1	BE0179
mouse CD1d	19G11	Rat IgG2b	BE0000
human CD3	UCHT1 (Leu-4)(T3)	Mouse IgG1	BE0231
human CD3	OKT-3	Mouse IgG2a	BE0001-2
mouse CD3	17A2	Rat IgG2b	BE0002
mouse CD3ε	145-2C11	Armenian Hamster IgG1	BE0001-1
mouse CD3ε	KT3	Rat IgG2a	BE0261
human CD4	OKT-4	Mouse IgG2b	BE0003-2
mouse CD4	YTS 177	Rat IgG2a	BE0003-3
mouse CD4	YTS 191	Rat IgG2b	BE0119
mouse CD4	GK1.5	Rat IgG2b	BE0003-1
mouse CD6	BX222	Rat IgG2b	BE0163
mouse CD8 (Lyt 2.1)	116-13.1 (HB129)	Mouse IgG2a	BE0118
human CD8α	OKT-8	Mouse IgG2a	BE0004-2
mouse CD8α	53-6.72	Rat IgG2a	BE0004-1
mouse CD8α	2.43	Rat IgG2b	BE0061
mouse CD8α	YTS169.4	Rat IgG2b	BE0117
mouse CD8β (Lyt 3.2)	53-5.8	Rat IgG1	BE0223
human CD11a (LFA-1α)	R7-1	Mouse IgG1	BE0192
mouse CD11b	M1/70	Rat IgG2b	BE0007
mouse CD18	M18/2	Rat IgG2a	BE0009
mouse CD19	1D3	Rat IgG2a	BE0150
human/monkey CD20	2H7	Mouse IgG2b	BE0276
mouse CD22	Cy34.1	Mouse IgG1	BE0011
mouse CD24	J11d	Rat IgM	BE0227
human CD25 (IL-2Rα)	7G7B6	Mouse IgG2a	BE0014
mouse CD25 (IL-2Rα)	PC-61.5.3	Rat IgG1	BE0012
mouse CD25 (IL-2Rα)	7D4	Rat IgM	BE0013
mouse CD28	PV-1	Armenian Hamster IgG	BE0015-5
rat CD28	JJ319	Mouse IgG1	BE0040
human CD28	9.3	Mouse IgG2a	BE0248
mouse CD28	37.51	Syrian Hamster IgG2	BE0015-1
mouse CD29	KMI6	Rat IgG2a	BE0232
human CD32 (FcγRIIA)	IV.3	Mouse IgG2b	BE0224
human CD40	G28.5	Mouse IgG1	BE0189
mouse CD40	FGK4.5/FGK45	Rat IgG2a	BE0016-2
human CD44	Hermes-1	Rat IgG2a	BE0262
mouse/human CD44	IM7	Rat IgG2b	BE0039
mouse CD45RB	MB23G2 (HB220)	Rat IgG2a	BE0019
human CD47	B6H12	Mouse IgG1	BE0019-1
mouse CD47 (IAP)	MIAP301	Rat IgG2a, kappa	BE0270
mouse CD48	HM48-1	Armenian Hamster IgG	BE0147
human CD54 (ICAM-1)	R6-5-D6	Mouse IgG2a	BE0020-2
mouse CD54 (ICAM-1)	YN1/1.7.4	Rat IgG2b	BE0020-1
mouse CD62L	Mel-14	Rat IgG2a	BE0021
mouse CD70	FR70	Rat IgG2b	BE0022
human CD71	OKT9	Mouse IgG1	BE0023
mouse CD71 (TfR1)	R17 217.1.3/ TIB-219	Rat IgG2a	BE0175
mouse CD73	TY/23	Rat IgG2a	BE0209
rat CD80	3H5	Mouse IgG1	BE0187
mouse CD80 (B7-1)	16-10A1	Armenian Hamster IgG2	BE0024
mouse CD86 (B7-2)	GL-1	Rat IgG2a	BE0025
mouse CD103	M290	Rat IgG2a	BE0026
mouse CD106 (VCAM-1)	M/K-2.7	Rat IgG1	BE0027
mouse CD122 (IL-2Rβ)	5H4	Rat IgG2a, kappa	BE0272
mouse CD132 (common γ chain)	3E12	Rat IgG2b	BE0271
mouse CD137 (4-1BB)	3H3	Rat IgG2a	BE0239
mouse CD154 (CD40L)	MR-1	Armenian Hamster IgG	BE0017-1
mouse CD209b (SIGN-R1)	22D1	Armenian Hamster IgG	BE0220
mouse CD317 (BST2, PDCA-1)	BX444	Rat IgG1	BE0255
human c-myc	9E10	Mouse IgG1	BE0238
mouse CSF1	5A1	Rat IgG1	BE0204
mouse CSF1R (CD115)	AFS98	Rat IgG2a	BE0213
mouse CTLA-4 (CD152)	UC10-4F10-11	Armenian Hamster IgG	BE0032
human CTLA-4 (CD152)	BN13	Mouse IgG2a	BE0190
mouse CTLA-4 (CD152)	9D9	Mouse IgG2b	BE0164
mouse CTLA-4 (CD152)	9H10	Syrian Hamster IgG2	BE0131
mouse CXCR3 (CD183)	CXCR3-173	Armenian Hamster IgG	BE0249
mouse Delta-like protein 1 (DLL1)	HMD1-5	Armenian Hamster IgG	BE0155
mouse DLL4	HMD4-2	Armenian Hamster IgG	BE0127
mouse DR5 (CD262)	MD5-1	Armenian Hamster IgG	BE0161
human E-Selectin	CL2	Mouse IgG2a	BE0136
mouse F4/80	CI:A3-1	Rat IgG2b	BE0206
FcRn heavy chain heterodimers	2G3	Mouse IgG1	BE0144
FcRn heavy chain heterodimers	1G3	Mouse IgG1	BE0222
mouse Galectin-9	RG9-1	Rat IgG2b	BE0218
mouse GITR	DTA-1	Rat IgG2b	BE0063
human Glycophorin A (type M)	6A7M	Mouse IgG1	BE0162
mouse GM-CSF	MP1-22E9	Rat IgG2a	BE0259
human/rat HER2 (neu)	7.16.4	Mouse IgG2a	BE0277
HIV gp120	55-36	Mouse IgG1	BE0154
mouse ICOS	7E.17G9	Rat IgG2b	BE0059
mouse ICOS	27A12	Syrian Hamster IgM	BE0226
mouse ICOSL (CD275)	HK5.3	Rat IgG2a	BE0028
mouse IFNAR-1	MAR1-5A3	Mouse IgG1	BE0241
human IFNγ	B133.5	Mouse IgG1	BE0235
human IFNγ	B27	Mouse IgG1	BE0245
mouse IFNγ	R4-6A2	Rat IgG1	BE0054
mouse IFNγ	XMG1.2	Rat IgG1	BE0055
mouse IFNγR (CD119)	GR-20	Rat IgG2a	BE0029
rat IgG1	RG11/39.4	Mouse IgG2a	BE0250
rat IgG2a	RG7/1.30	Mouse IgG2b	BE0251
rat IgG2b	RG7/11.1	Mouse IgG2b	BE0252
mouse IL-1 R (CD121a)	JAMA-147	Armenian Hamster IgG	BE0256
mouse IL-10	JES5-2A5	Rat IgG1	BE0049
mouse IL-10R (CD210)	1B1.3A	Rat IgG1	BE0050
mouse IL-12	R1-5D9	Rat IgG2a	BE0052
mouse IL-12 p40	C17.8	Rat IgG2a	BE0051
human IL-12 p70	20C2	Rat IgG1	BE0234
mouse IL-12 p75	R2-9A5	Rat IgG2b	BE0233
mouse IL-17A	17F3	Mouse IgG1	BE0173
mouse IL-18	YIGIF74-1G7	Rat IgG2a	BE0237
mouse IL-1α	ALF-161	Armenian Hamster IgG	BE0243
mouse/rat IL-1β	B122	Armenian Hamster IgG	BE0246
mouse IL-2	JES6-1A12	Rat IgG2a	BE0043
mouse IL-2	S4B6-1	Rat IgG2a	BE0043-1
mouse IL-2	JES6-5H4	Rat IgG2b	BE0042
mouse IL-21R	4A9	Rat IgG2a	BE0258
human IL-4	MP4-25D2	Rat IgG1	BE0240
mouse IL-4	11B11	Rat IgG1	BE0045
mouse IL-4	BVD6-24G2	Rat IgG1	BE0199
mouse/human IL-5	TRFK5	Rat IgG1	BE0198
mouse IL-6	MP5-20F3	Rat IgG1	BE0046
mouse IL-6R	15A7	Rat IgG2b	BE0047
mouse/human IL-7	M25	Mouse IgG2b	BE0048
mouse IL-7Rα (CD127)	A7R34	Rat IgG2a	BE0065
mouse IL-9	9C1	Mouse IgG2a	BE0181
Influenza A virus NP	H16-L10-4R5 (HB65)	Mouse IgG2a	BE0159
mouse/human Integrin β7	FIB504	Rat IgG2a	BE0062
mouse Jagged2	HMJ2-1	Armenian Hamster IgG	BE0125
Kappa Immunoglobulin Light Chain	MAR 18.5	Mouse IgG2a	BE0122
mouse Kappa Immunoglobulin Light Chain	187.1 (HB58)	Rat IgG1	BE0176
mouse/human KLRG-1	2F1	Syrian Hamster IgG	BE0201
mouse LAG-3	C9B7W	Rat IgG1	BE0174
LCMV nucleoprotein	VL-4	Rat	BE0106
human/bovine LDLR	C7	Mouse IgG2b	BE0133
human LFA-1α (CD11a)	TS-1/22.1.1.13	Mouse IgG1	BE0005
mouse LFA-1α (CD11a)	M17/4	Rat IgG2a	BE0006
mouse LFA-1α (CD11a)	FD441.8	Rat IgG2b	BE0005-1
mouse LPAM-1 (Integrin α4β7)	DATK32	Rat IgG2a	BE0034
mouse Ly6C	MONTS-1	Rat IgG2a	BE0203
mouse Ly6G	1A8	Rat IgG2a	BE0075-1
mouse Ly6G (Gr-1)	RB6-8C5	Rat IgG2b	BE0075
mouse MAdCAM-1	MECA-367	Rat IgG2a	BE0035
mouse MHC Class I (H-2)	M1/42.3.9.8	Rat IgG2a	BE0077
mouse MHC Class I (H-2Dk, H-2Kd, H-2Kf)	15-5-5S (HB24)	Mouse IgG2a	BE0229
mouse MHC Class I (H-2Kb)	AF6-88.5.5.3	Mouse IgG2a	BE0121
mouse MHC Class I (H-2Kb)	Y-3	Mouse IgG2b	BE0172
mouse MHC Class I (H-2Kb) bound to SIINFEKL peptide (OVA residues 257-264)	25-D1.16	Mouse IgG1	BE0207
mouse MHC Class I (H-2Kd)	SF1.1.10 (HB159)	Mouse IgG2a	BE0104
mouse MHC Class I (H-2Kd, H-2Dd)	34-1-2S	Mouse IgG2a	BE0180
mouse MHC Class I (H-2Kk)	AF3-12.1.3	Mouse IgG1	BE0152
mouse MHC Class I (H-2Kk, H-2Dk)	15-3-1S (HB13)	Mouse IgG2a	BE0158
mouse MHC Class I (H-2Kk, H-2Dk)	16-1-2N (HB14)	Mouse IgG2a	BE0228
human MHC Class I (HLA-A, HLA-B, HLA-C)	W6/32	Mouse IgG2a	BE0079
mouse MHC class II (I-A)	Y-3P	Mouse IgG2a	BE0178
mouse MHC Class II (I-A/I-E)	M5/114	Rat IgG2b	BE0108
mouse MHC Class II (I-Ab, I-Ad)	28-16-85	Mouse IgM	BE0219
mouse MHC Class II (I-Ak, I-Ar, I-Af, I-As,I-Ag7)	10-3.6.2	Mouse IgG2a	BE0068
mouse/rat MHC Class II (I-Ek/RT1-D)	14-4-4S/HB-32	Mouse IgG2a	BE0167
mouse MHC Class II (β chain)	KL277	Hamster/Mouse IgG	BE0140
human N-cadherin (CD325)	8C11	Mouse IgG1	BE0184
mouse NK1.1	PK136	Mouse IgG2a	BE0036
mouse NKG2D	HMG2D	Armenian Hamster IgG	BE0111
mouse Nonclassical MHC Class I molecule Qa-1b	4C2.4A7.5H11	Mouse IgG1	BE0165
mouse Notch4	HMN4-14	Armenian Hamster IgG	BE0129
mouse OX40 (CD134)	OX-86	Rat IgG1	BE0031
mouse OX40L (CD134L)	RM134L	Rat IgG2b	BE0033-1
mouse Pan-endothelial Cell Antigen (MECA-32)	MECA-32	Rat IgG2a	BE0200
mouse PD-1 (CD279)	J43	Armenian Hamster IgG	BE0033-2
human PD-1 (CD279)	J116	Mouse IgG1	BE0188
human PD-1 (CD279)	J110	Mouse IgG1	BE0193
mouse PD-1 (CD279)	RMP1-14	Rat IgG2a	BE0146
mouse PD-1 (CD279)	29F.1A12	Rat IgG2a, kappa	BE0273
mouse PD-L1 (B7-H1)	10F.9G2	Rat IgG2b	BE0101
mouse PD-L2 (B7-DC)	TY25	Rat IgG2a	BE0112
Phosphotyrosine	4G10	Mouse IgG2b	BE0194
mouse Podoplanin (gp38)	8.1.1	Syrian Hamster IgG	BE0236
mouse PSGL-1 (CD162)	4RA10	Rat IgG1	BE0186
mouse RANKL (CD254)	IK22/5	Rat IgG2a	BE0191
mouse Reticular Fibroblasts and Reticular Fibres (ER-TR7)	ER-TR7	Rat IgG2a	BE0253
mouse Siglec-H	440c	Rat IgG2b	BE0202
swine MHC Class I (SLAd)	74-11-10 (HB139)	Mouse IgG2b	BE0120
mouse T15 VH and T15 VL regions of IgM	AB1-2 (HB33)	Mouse IgG1	BE0072
mouse/human T-bet	4B10	Mouse IgG1	BE0100
mouse TCR Vγ1.1/Cr4	2.11	Armenian Hamster IgG	BE0257
mouse TCR γ/δ	UC7-13D5	Armenian Hamster IgG	BE0070
mouse TCRβ	H57-597 (HB218)	Armenian Hamster IgG	BE0102
mouse Ter-119	TER-119	Rat IgG2b	BE0183
mouse/human/rat/ monkey/hamster/canine/ bovine TGF-β	1D11.16.8	Mouse IgG1	BE0057
mouse Thy1 (CD90)	M5/49.4.1	Rat IgG2a	BE0076
mouse Thy1 (CD90)	T24/31	Rat IgG2b	BE0212
mouse Thy1.1 (CD90.1)	19E12	Mouse IgG2a	BE0214
mouse Thy1.2 (CD90.2)	30H12	Rat IgG2b	BE0066
mouse TIGIT	1G9	Mouse IgG1, kappa	BE0274
mouse TIM-1	RMT1-10	Rat IgG2a	BE0113
mouse TIM-2	RMT2-29	Rat IgM	BE0114
mouse TIM-3 (CD366)	B8.2C12	Rat IgG1	BE0275
mouse TIM-3 (CD366)	RMT3-23	Rat IgG2a	BE0115
mouse TIM-4	RMT4-53	Rat IgG2a	BE0171
mouse TIM-4	RMT4-54	Rat IgG2a	BE0225
mouse TNFR2 (CD120b)	TR75-54.7	Armenian Hamster IgG	BE0247
mouse/rat/rabbit TNFα	TN3-19.12	Armenian Hamster IgG	BE0244
mouse TNFα	XT3.11	Rat IgG1	BE0058
mouse/human TYRP1/TRP1 (gp75)	TA99	Mouse IgG2a	BE0151
mouse VEGFR-2	DC101	Rat IgG1	BE0060
mouse/human/rat v-H-Ras	Y13-238	Rat IgG2a	BE0139
mouse/human VLA-4 (CD49d)	PS/2	Rat IgG2b	BE0071
mouse Vβ4 TCR	KT4	Rat IgG2b	BE0166
mouse Vβ8 TCR	F23.1	Mouse IgG2a	BE0182
mouse Vγ2 TCR	UC3-10A6 (Replaces clone UC7-13D5)	Armenian Hamster IgG	BE0168
human YB-1	21A3	Mouse IgG1	BE0216
rat β-2-Microglobulin	4C9	Mouse IgG1	BE0143
human β-2-Microglobulin	BBM.1	Mouse IgG2b	BE0141

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■InVivoMab™ Isotype Control

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製品名	クローン	アイソタイプ	メーカー 製品番号
InVivoMAb™ Armenian Hamster IgG Isotype control; GST	PIP	Armenian Hamster IgG	BE0260
InVivoMAb™ Mouse IgG1 Isotype control; Unknown Specificity	MOPC-21	Mouse IgG1	BE0083
InVivoMAb™ Mouse IgG2a Isotype control; Unknown Specificity	C1.18.4	Mouse IgG2a	BE0085
InVivoMAb™ Mouse IgG2b Isotype control; Unknown Specificity	MPC-11	Mouse IgG2b	BE0086
InVivoMAb™ Polyclonal Armenian Hamster IgG, Unknown Specificity		Armenian Hamster IgG	BE0091
InVivoMAb™ Polyclonal Goat IgG, Unknown Specificity		Goat IgG	BE0130
InVivoMAb™ Polyclonal Human IgG, Unknown Specificity		Human IgG	BE0092
InVivoMAb™ Polyclonal Mouse IgG, Unknown Specificity		Mouse IgG	BE0093
InVivoMAb™ Polyclonal Rabbit IgG, Unknown Specificity		Rabbit IgG	BE0095
InVivoMAb™ Polyclonal Rat IgG, Unknown Specificity		Rat IgG	BE0094
InVivoMAb™ Polyclonal Syrian Hamster IgG, Unknown Specificity		Syrian Hamster IgG	BE0087
InVivoMAb™ Rat IgG1 Isotype control; anti Horseradish Peroxidase	HRPN	Rat IgG1	BE0088
InVivoMAb™ Rat IgG2a Isotype control; anti Trinitrophenol	2A3	Rat IgG2a	BE0089
InVivoMAb™ Rat IgG2b Isotype control; anti KLH	LTF-2	Rat IgG2b	BE0090

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■InvivoPlus™

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抗原	クローン	アイソタイプ	メーカー 製品番号
mouse CD25 (IL-2Rα)	PC-61.5.3	Rat IgG1	BP0012
mouse CD3ε	145-2C11	Armenian Hamster IgG	BP0001-1
mouse CD4	GK1.5	Rat IgG2b	BP0003-1
mouse CD8α	53-6.72	Rat IgG2a	BP0004-1
mouse CD8α	2.43	Rat IgG2b	BP0061
mouse CD8α	YTS169.4	Rat IgG2b	BP0117
mouse CD40	FGK4.5/FGK45	Rat IgG2a	BP0016-2
mouse CTLA-4 (CD152)	9D9	Mouse IgG2b	BP0164
mouse CTLA-4 (CD152)	9H10	Syrian Hamster IgG2	BP0131
mouse IFNAR-1	MAR1-5A3	Mouse IgG1	BP0241
mouse IFNγ	XMG1.2	Rat IgG1	BP0055
mouse IL-4	11B11	Rat IgG1	BP0045
mouse IL-10R (CD210)	1B1.3A	Rat IgG1	BP0050
mouse IL-12 p40	C17.8	Rat IgG2a	BP0051
mouse LAG-3	C9B7W	Rat IgG1	BP0174
mouse Ly6G	1A8	Rat IgG2a	BP0075-1
mouse Ly6G (Gr-1)	RB6-8C5	Rat IgG2b	BP0075
mouse NK1.1	PK136	Mouse IgG2a	BP0036
mouse PD-1 (CD279)	J43	Armenian Hamster IgG	BP0033-2
mouse PD-1 (CD279)	RMP1-14	Rat IgG2a	BP0146
mouse PD-L1 (B7-H1)	10F.9G2	Rat IgG2b	BP0101
mouse/human/rat/monkey/ hamster/canine/bovine TGF-β	1D11.16.8	Mouse IgG1	BP0057
mouse Thy1.2 (CD90.2)	30H12	Rat IgG2b	BP0066
mouse TIM-3 (CD366)	RMT3-23	Rat IgG2a	BP0115
mouse TNFα	XT3.11	Rat IgG1	BP0058
mouse VEGFR-2	DC101	Rat IgG1	BP0060

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■InVivoPlus™ Isotype Control

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製品名	クローン	アイソタイプ	メーカー 製品番号
InVivoPlus™ Mouse IgG1 Isotype control; Unknown Specificity	MOPC-21	Mouse IgG1	BP0083
InVivoPlus™ Mouse IgG2a Isotype control; Unknown Specificity	C1.18.4	Mouse IgG2a	BP0085
InVivoPlus™ Mouse IgG2b Isotype control; Unknown Specificity	MPC-11	Mouse IgG2b	BP0086
InVivoPlus™ Polyclonal Armenian Hamster IgG, Unknown Specificity		Armenian Hamster IgG	BP0091
InVivoPlus™ Polyclonal Syrian Hamster IgG, Unknown Specificity		Syrian Hamster IgG	BP0087
InVivoPlus™ Rat IgG1 Isotype Control, anti- Horseradish Peroxidase	HRPN	Rat IgG1	BP0088
InVivoPlus™ Rat IgG2a Isotype Control, anti-Trinitrophenol	2A3	Rat IgG2a	BP0089
InVivoPlus™ Rat IgG2b Isotype Control, anti-KLH	LTF-2	Rat IgG2b	BP0090

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■ReadyTag™

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抗原	クローン	アイソタイプ	メーカー 製品番号
6-His	6-His	Mouse IgG1	RT0266
c-myc	9E10	Mouse IgG1	RT0263
DDDDK	AP1501	Mouse IgG2b	RT0269
GFP	F56-6A1.2.3	Mouse IgG2b	RT0265
GST	F50-3D12.2	Mouse IgG1	RT0264
HA	12CA5	Mouse IgG2b	RT0268
OVA	F2-3.58	Mouse IgG1	RT0267

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ウェブ掲載例

■InVivoPlus™抗マウスPD-L1抗体

ほぼすべての抗体で参考文献が一覧で掲載されており、またアプリケーション情報やマウス病原体フリーの確認など、in vivo試験に有用な抗体情報が充実しています。

 

※記載の内容は、'16年6月現在の情報に基づいております。 

 

Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit

May 8, 2016, 11:30 pm

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Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit

本製品はアポトーシスを検出するキットです。FITCで蛍光標識したアネキシンVとPIを利用し、初期のアポトーシスと後期のアポトーシスを検出することが可能です。

 

現在、本製品の40%Offキャンペーンを開催中です。詳細はこちらをご覧ください。

 

特長

• 簡便にアポトーシス初期、アポトーシス後期の観察が可能
• 細胞の固定は不要
• フローサイトメトリーまたは蛍光顕微鏡で検出可能

 

 

| 原理 | 実施例1 | 実施例2 | 性能比較 | 性能評価 | キット構成 | 試薬の調製 | 使用方法 |

| 参考文献 | 価格表 |

 

 

 

原理

正常細胞	アポトーシス初期	アポトーシス後期

正常な細胞では、膜リン脂質であるホスファチジルセリン（PS）が細胞膜の内側に存在するため、アネキシンVは認識されません。アポトーシス初期の細胞では、細胞膜構造は維持したまま、PSが細胞表面に露出してくるため、FITC標識アネキシンVに認識されて細胞表面だけが緑（FITC）に染色されます。アポトーシス後期の細胞では、細胞内にPIが取り込まれるようになり、細胞内が赤（PI）に染色されます。

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実施例1

■アポトーシス誘導細胞の蛍光画像

 

明視野観察	蛍光観察

Jurkat細胞に1μg/mlのスタウロスポリンを37℃で3.5時間作用させてアポトーシスを誘導し、蛍光顕微鏡で観察した。 

FITC標識アネキシン（緑）

PI（赤）

 

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実施例2

■アポトーシス誘導細胞のフローサイトメトリー解析

コントロール（未処理）	アポトーシス誘導細胞

Jurkat細胞に1μg/mlのスタウロスポリンを37℃で3.5時間作用させてアポトーシスを誘導し、フローサイトメーターで解析した。

 

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性能比較

■アポトーシス検出キット性能比較

	コントロール（未処理）	シクロヘキシミド処理	UV処理
A社製品
自社品

細胞種：マウスB16メラノーマ細胞

細胞数：10,000個

検出装置：Gallios（ベックマン・コールター社） 

 

シクロヘキシミドおよびUV照射（1μg/ml）によりアポトーシスを誘導し（37℃、3.5時間）、フローサイトメーターで解析したところ、本キットはA社製品と同等の性能を有していることを示した。

未処理においては、アポトーシスは認められなかった。シクロヘキシミドでアポトーシスを誘導すると、アポトーシス初期の細胞が多数確認できた。またUV処理した細胞でもアポトーシスが確認できた。

-- ： FITC標識アネキシンVおよびPIの双方共に蛍光値が低い。生細胞領域。

+- ： FITC標識アネキシンVの蛍光値は高く、PIは低い。アポトーシス初期。

++ ： FITC標識アネキシンVおよびPIの双方共に蛍光値が高い。アポトーシス後期。

  

データご提供：京都大学大学院 薬学研究科 病態情報薬学

高橋 有己 助教

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性能評価

■アポトーシス検出キット性能評価

グルコースを除き飢餓状態（48時間）によりアポトーシスを誘導し、イメージングサイトメーターで解析したところ、アポトーシス初期の細胞が確認できた。

コントロール（未処理）	飢餓状態（48時間）

細胞種：U-87 MG 細胞

検出装置：Tali^＠イメージサイトメーター（サーモフィッシャーサイエンティフィック社）

データご提供：京都府立医科大学大学院 医学研究科 生体情報・機能形態学分野 神経発生生物学（生物学教室）

後藤 仁志 教授

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キット構成

試薬名	容量	数量
アネキシンV-FITC溶液	250μl	2
ヨウ化プロピジウム（PI）溶液	250μl	2
アネキシンV結合バッファー（10倍濃縮）	10ml	2

注）本製品は100回用です。

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試薬の調製

■アネキシンV結合溶液（1×）の調製

アネキシンV結合バッファー（10倍濃縮）を超純水で10倍希釈します。

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使用方法

■浮遊細胞 

①細胞を回収し、PBSで2回洗浄します。

②アネキシンV結合溶液（1×）を用いて、最終細胞密度が1×10⁶cells/mlとなるように細胞を懸濁します。

③新しいチューブに、細胞懸濁液を100μl移します。

④アネキシンV-FITC 溶液を5μl、次にPI溶液を5μl添加します。

⑤遮光して、室温で15分反応させます。

⑥アネキシンV結合溶液（1×）を400μl加え、ゆっくりと混合します。

⑦できるだけ早く、フローサイトメトリー、または蛍光顕微鏡で解析します。

 

■接着細胞

①培養液を除去します。

②PBSで細胞を2回洗浄します。

③トリプシン-EDTA溶液を用いて細胞を剥離します。

④適当量の培地、またはPBSで細胞を懸濁し、遠心用チューブに移します。

⑤遠心して細胞を回収します。

⑥細胞をPBSで2回洗浄します。

⑦アネキシンV結合溶液（1×）を用いて、最終細胞密度が1×10⁶cells/mlとなるように細胞を懸濁します。

⑧新しいチューブに、細胞懸濁液を100μl移します。

⑨アネキシンV-FITC溶液を5μl、次にPI溶液を5μl添加します。

⑩遮光して、室温で15分反応させます。

⑪アネキシンV結合溶液（1×）を400μl加え、ゆっくりと混合します。

⑫できるだけ早く、フローサイトメトリー、または蛍光顕微鏡で解析します。

注）接着細胞は、細胞剥離操作時に特異的な細胞膜損傷を受けるため、アネキシンV-FITCのフローサイトメトリー解析には使われないこともありますが、Casiola-Rosenらやvan Engelandらにより、接着細胞を用いたフローサイトメトリーによるアネキシンVの検出方法が報告されています。

	excitation / emission
FITC標識アネキシン V	494 nm / 518 nm
PI	535 nm / 617 nm

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参考文献

1. Casciola-Rosen L, Rosen A, Petri M, Schlissel M, Proc Natl Acad Sci USA, 93(4), 1624 (1996)

2. van Engeland M, Remaekers FC, Schutte B, Reutelingsperger CP, Cytometry, 24(2), 131 (1996)

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価格表

製品名	貯法	製品番号	容量	オンライン カタログへ
Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit	冷蔵	15342-54	100 tests

 

※記載の内容は、'16年6月現在の情報に基づいております。

アポトーシス研究試薬キャンペーン

June 19, 2016, 4:00 am

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弊社新製品アネキシンV-FITC アポトーシス検出キット、Tocris社アポトーシス研究試薬を希望納入価格の40％Offで提供します。この機会にぜひご利用ください。

 

アネキシンV-FITC アポトーシス検出キットの詳細はこちらをご覧ください。

 

 

※Tocris社アポトーシス研究試薬の対象製品はこちらをご覧ください。

 

期間：2016年6月20日（月）～2016年8月31日（水）

内容：希望納入価格の 40％OFF

 

 

   

▸キャンペーンフライヤーPDF（2.34MB）

 

 

Tocris社　2016年6月新製品

June 20, 2016, 4:00 am

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New products are an essential component of our range. Introductions are made on an ongoing basis, with hundreds of new small molecules, peptides and antibodies being added every year. Our aim is to find the latest, otherwise unobtainable research tools, and bring them to the market as quickly as we can.

 

 

Cat.No.	Product Name	Activity
5941	OD1	Potent hNav1.4, rNav1.6 and rNav1.7 channel activator
5940	AdTx1	Selective, high affinity, non-competitive α1A adrenoceptor antagonist
5938	Mambalgin 1	Selective ASIC1a inhibitor; analgesic
5930	PBIT	JARID1 (Jumonji AT-Rich Interactive Domain 1) inhibitor
5916	Canertinib dihydrochloride	Potent EGFR kinase inhibitor
5869	CDN 1163	SERCA2 allosteric activator
5856	Ritonavir	HIV-1 and HIV-2 protease inhibitor
5781	A 425619	Potent TRPV1 antagonist
5707	RA 839	Nrf2 activator; inhibits Nrf2/Keap1 interaction
5671	SB 332235	Potent CXCR2 antagonist
5937	A 779	Selective Mas receptor (Ang-(1-7) receptor) antagonist
5928	RS 09	TLR4 peptide agonist; acts as an adjuvant in vivo
5852	Acetyl Pepstatin	High affinity aspartic protease inhibitor; inhibits HIV-1/2 proteinases
5837	[Pro3]-GIP (Rat)	High affinity rat GIP receptor partial agonist
5800	CHMFL-FLT3-122	Potent and selective FLT3 inhibitor
5838	[Pro3]-GIP (Mouse)	GIP receptor antagonist
5774	DEL 22379	ERK dimerization inhibitor
5722	Ogerin	Selective positive allosteric modulator at GPR68
5464	AC 4	Photoswitchable TRPV1 channel blocker
4503	CC 0651	Allosteric inhibitor of hCdc34

 

 

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Bullet PAGE One用高速転写緩衝液　Bullet Semi-dry Transfer One

June 20, 2016, 12:12 am

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Bullet PAGE One用高速転写緩衝液
Bullet Semi-dry Transfer One

本製品は、セミドライ式ブロッティング用の転写緩衝液です。Bullet PAGE Oneプレキャストゲルからウェスタンブロッティングを行う際に、本製品を転写緩衝液として使用するだけで、わずか10分の短時間で転写を完了させることができます。また、ブロッキング剤のBullet Blocking Oneを組み合わせることで、実験時間の大幅な短縮が可能です。
※本製品はBullet PAGE Oneプレキャストゲル用の転写緩衝液です。他のゲルへの使用については予備検討を行ってください。

 

 

特長

• わずか10分で転写が完了
• 幅広い分子量を効率良く転写
• ゲルの平衡化処理不要
• Ready to use

 

 

 

| 性能比較 | 使用例 | 使用方法 | 価格表 | 関連製品 |

性能比較

■従来法との比較

本製品の使用により、短時間でも泳動ゲルからメンブレンに効率良くタンパク質を転写できます。従来のKyhse-Andersen（1984）やTowbin（1979）をBullet Semi-dry Transfer Oneと同条件で比較した結果、本製品の転写効率の高いことが確認されました。

転写緩衝液	Bullet Semi-dry Transfer One	Kyhse-Andersen 法組成*1	Towbin 法組成*2
転写条件	10V（定電圧）、10分
転写後

*1 Kyhse-Andersen J.1984. J. Bio chem. Biophys. Methods 10:203-209
組成：48 mM Tris, 39 mM Glycine, 20% Methanol, 0.04% SDS
*2 Towbin H., Staehelin T., and Gordon J. 1979. Proc. Natl. Acad Sci 76:4350-4354.
組成：25 mM Tris, 192 mM Glycine, 20% Methanol 

 

＜実験条件＞
電気泳動ゲル：Bullet PAGE One Precast Gel 5-15%（#13079）
サンプル

1. Protein Ladder One（#09547）を5μl/レーン添加
2. タンパク質マーカー(10X)（#29458）を2μl/レーン添加
3. タンパク質マーカー(10X)（#29458）を3倍希釈したものを2μl/レーン添加
4. タンパク質マーカー(10X)（#29458）を10倍希釈したものを2μl/レーン添加
5. タンパク質マーカー(10X)（#29458）を30倍希釈したものを2μl/レーン添加

メンブレン：PVDF
転写（セミドライ式）：10V（定電圧）で10分
検出：CBB Stain One（#04543）

 

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使用例

■抗原抗体反応による検出

β-Actinの結果のように、強いシグナルで検出される場合は10V、10分の転写で十分にバンドを確認することができますが、COX4の結果のようにシグナルが弱い場合は、電圧を上げることにより、転写時間は10分でも感度アップが図れます。

検出タンパク質	β-Actin	COX4
電圧	10V	10V	25V
転写時間	10分
検出 （化学発光）

 

＜方法＞
●サンプル
HL-60細胞からRIPA Buffer（#08714）により抽出したタンパク質

●操作概要
使用例は、実験の超高速化を実現するBulletシリーズを組み合わせて使用した結果です。電気泳動、転写、ブロッキングの各操作時間を大幅に短縮できています。

使用例は、実験の超高速化を実現するBulletシリーズを組み合わせて使用した結果です。電気泳動、転写、ブロッキングの各操作時間を大幅に短縮できています。

操作	使用した製品	操作時間
電気泳動	Bullet PAGE One Precast Gel 5-15%（#13079）	10分
セミドライ式転写	Bullet Semi-dry Transfer One（#15353） *メンブレンはPVDF	5分
ブロッキング	Bullet Blocking One（#13779)	5分
一次抗体反応	Anti β-Actin(C4)(Mouse), Monoclonal （Santa Cruz #sc-47778）1,000倍希釈	60分
	Anti-COX4(D-20)(Goat) (Santa Cruz #sc-69359） 1,000倍希釈
二次抗体反応	Anti-Mouse IgG(Goat), HRP Conjugate （Santa Cruz #sc-2005）10,000倍希釈	60分
	Anti-Goat IgG(Bovine), HRP Conjugate （Santa Cruz #sc-2350）10,000倍希釈
化学発光検出	Chemi-Lumi One Super（#02230）	露光5分

 

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使用方法

■実験プロトコール（セミドライ式・PVDFメンブレン・高速転写）

1.転写膜の準備
清潔なトレイ（ディスポトレイなど）に100％メタノール約50mlを注ぎ込み、 PVDFメンブレンの端から順次液中に浸み込ませる要領で浸します。約1分振とう後、メタノールを完全に捨て、精製水で洗浄します。 

2.電極板へのセット

①PVDFメンブレンよりも一回り大きく切ったろ紙12枚を準備します。

②トレイ1とは別に、清潔なトレイを準備します（トレイ2）。

　Bullet Semi-dry Transfer One約40～50 mlを注ぎ込みます。

③ろ紙を一枚ずつトレイ2の転写用緩衝液に浸し、トレイ壁で余分な液を拭って電極版（陽極）上に

　ろ紙端から順次密着させる要領で置いていきます。あとの5枚も同様の操作を繰り返します（合計

　6枚のろ紙を重ねます）。

④PVDFメンブレンをろ紙同様の要領でろ紙上におきます。

⑤泳動後のゲルを精製水で10秒程度（10～20秒）洗浄し、メンブレンの上に重ねて、ゲルの裏表

　および端がわかるようにボールペンで印をつけます。残りのろ紙も、同じ要領でゲルの上に重ねて

　いきます。  

 

⑥電極板（陰極）を取り付け（この時、PVDFメンブレン、ゲルは下図のようにセットされてい

　ます）、電源とブロッティング装置を結線し、10～25Vの定電圧で10分通電します（ミニ

　ゲル（10cm×10cm）で1枚を転写する場合）。

 

 

Bullet PAGE One Precast Gel（ゲル1枚）転写時の電圧と最大電流値

電圧	転写時間	最大電流値（開始時）
25 V	10分	約1.2A
10 V	10分	約330mA

転写条件は上の表を参考に設定してください。10V（定電圧）、10分で転写効率が不十分な場合は、転写時間を延長するか、 25V（定電圧）で行ってください。

 

⑦電源とブロッティング装置の結線を取り除き、電極板（陰極）側から順次剥がす要領でろ紙を取り

　除きます。転写が終了したメンブレンをt-PBS、t-TBS などに浸し、次の工程に進みます（作業を

　中断する場合は、メンブレンが乾かないようにt-PBS、t-TBSに浸します）。

 

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価格表

製品名	規格	貯法	製品番号	容量	オンラインカタログへ
Bullet Semi-dry Transfer One	SP	室温	15353-01	1 L

 

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関連製品

■Bullet シリーズによる超高速化

Bullet Semi-dry Transfer Oneの他にも、電気泳動からウェスタンブロッティングを高速化する製品を販売しています。これらを組み合わせることで、電気泳動からウェスタンブロッティングの超高速化を実現します。 表中の製品名をクリックすることで、各製品の詳細をご覧いただけます。

	Bulletシリーズ	従来手法
組み合わせ	・Bullet PAGE One Precast Gel ・Bullet Semi-dry Transfer One ・Bullet Blocking One	・一般的なSDS-PAGE用ゲル ・ブロッキング剤（5%スキムミルク）
電気泳動	約10分(400V)	約1時間(200V)
転写	10分	45分
ブロッキング	5分	約1時間
抗体反応～検出	2時間40分
計	約3時間	約5時間30分

 

 

※記載の内容は、'16年6月現在の情報に基づいております。

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TOCRIS社全製品 40% Off キャンペーン

June 30, 2016, 4:00 am

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Tocris社は、GPCRリガンド、神経伝達物質、イオンチャネル調節物質、シグナル伝達阻害剤などを中心に4,000品目以上を取り扱っています。この度Tocris社全製品を特別価格で提供しますので、ご利用ください。

 

期間：2016年7月1日（金）～8月31日（水）

 

内容：Tocris社全製品 希望納入価格の 40% Off

 

 

▶キャンペーン内容はこちら（PDF 517KB）

 

InvivoGen社 リレーキャンペーン第1弾

June 30, 2016, 4:00 am

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InvivoGen社は自然免疫研究用試薬で高い評価を受けているメーカーです。リレーキャンペーン第1弾として、Fc融合タンパク質発現ベクターおよび抗体作製用ベクターを特別価格で提供します！

この機会にぜひご利用ください。

 

※InvivoGen社リレーキャンペーン第1弾の対象製品はこちらをご覧ください。 

 

期間：2016年7月1日（金）～2016年8月31日（水）

内容：希望納入価格の 30％OFF

 

 

▸キャンペーンフライヤーPDF（1.75MB）

 

 

Alomone社　proNGF

July 1, 2016, 2:07 am

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Alomone社　proNGF

Alomone社では、NGF（Nerve Growth Factor）の前駆物質proNGFと、proNGFに特異的な抗体を販売しています。proNGFは細胞の成育にはほとんど関与しませんが、神経突起伸長を促します（下図参照）。また最近の研究ではproNGFはp75^NTR受容体を介してアポトーシスを誘導することが報告されています。Alomone社のproNGFは、神経突起伸長（特にPC-12細胞の軸索伸長）の実験にご使用いただけます。proNGF（mutated）は、プロテアーゼの分解を受けにくく、アポトーシスを誘導し易いことから、アポトーシス誘導因子としての用途も考えられます。

 

 

使用例

■proNGFの性質

proNGFは細胞の成育にはほとんど関与せず、神経突起伸長を促します。
Ａ：PC12細胞を、DMEM（6% FCS、6% HS含有）存在下、コラーゲンコートされた24ウェルプレートで24時間培養後、2nM hβ-NGF（#N-245）または 2nM proNGF（WT-human）（#N-280）を添加し、2日ごとに培地交換を行いました。7日後、培養細胞をメチレンブルーで染色しました。
Ｂ：PC12細胞を無血清で培養後、hβ-NGF（◆） または proNGF（WT-human）（■）を種々の濃度で添加し、4日後細胞増殖をXTT法で測定し、NGF/proNGFを添加していないコントロールに対する割合をプロットしました。

 

 

■Anti-proNGFの特異性

下記のNerve Growth FactorへのAnti-proNGF（#ANT-005）の反応性をWestern Blottingにより確認しました。
この抗体はmature NGFを認識せず、proNGFのみを認識しました。

1. mNGF 2.5S（#N-240）
2. mNGF 2.5S（#N-100）
3. mNGF 7S（#N-130）
4. hβ-NGF（#N-245）
5. proNGF（mutated-mouse）（#N-255）
6. proNGF（WT-mouse）（#N-250）

（各レーン1μg） 

 

 

価格表

■proNGF

製品名	メーカー 製品番号	オンライン カタログへ
proNGF (WT-mouse) recombinant, E. coli	N250
proNGF (mutated-mouse) recombinant, E. coli	N255
proNGF (WT-human) recombinant, E. coli	N280
proNGF (mutated-human) recombinant, E. coli	N285

■Nerve Growth Factors

製品名	メーカー 製品番号	オンライン カタログへ
mNGF 2.5S (99%)	N-240
mNGF 2.5S (>95%)	N-100
mNGF 7S	N-130
hβ-NGF recombinant, E. coli	N-245

■Antibodies

製品名	毒劇物	免疫動物	適用	交差性	メーカー 製品番号	オンライン カタログへ
Anti-proNGF	毒	Rabbit Polyclonal	WB, IH	Hu, Ms, Rt	ANT-005
Anti-proNGF	毒	Guinea pig Polyclonal	WB, IH	Hu, Ms, Rt	AGP-031
Anti-mNGF	毒	Rabbit Polyclonal	WB, IH	Hu, Ms, Rt	AN-240
Anti-Human p75NTR (extracellular)	毒	Rabbit Polyclonal	WB, IH, IC, IFC, IP, LCI	Hu, Ms, Rt	ANT-007
Anti-Human p75NTR (extracellular)-FITC	毒	Rabbit Polyclonal	FC	Hu, Ms, Rt	ANT-007-F
Anti-Human p75NTR (intracellular)	毒	Rabbit Polyclonal	WB, IH	Hu, Ms, Rt	ANT-011
Anti-Rat p75NTR (extracellular)	毒	Mouse Monoclonal	WB, IH, IFC	Rat only	AN-170
Anti-Rat p75NTR (extracellular)-FITC	毒	Mouse Monoclonal	FC	Rat only	AN-170-F
Anti-Sortilin (extracellular)	毒	Rabbit Polyclonal	WB, IH	Hu, Ms, Rt	ANT-009

Hu:Human　　Ms:Mouse　　Rt:Rat
FC:Flow Cytometry　　IC:Immunocytochemistry　　IFC:Indirect Flow Cytometry　　IH:Immunohistochemistry　　IP:Immunoprecipitation　　LCI:Live Cell Imaging　　WB:Western Blotting

 

※記載の内容は、'11年2月現在の情報に基づいております。

Evrogen社　細胞内センサー蛍光タンパク質発現ベクター

July 5, 2016, 12:00 am

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Evrogen社　細胞内センサー蛍光タンパク質発現ベクター

 

 

 

 

Evrogen社の細胞内のカルシウムイオンや過酸化水素の濃度変化を感知する蛍光タンパク質発現ベクターを紹介します。

 

Calcium ion sensor Case12（カルシウムイオンインジケーター）

pCase12-cytoは、カルシウムイオン濃度の変化に応じて蛍光強度が変化する性質を有するCase12タンパク質を発現するベクターです。本製品は、さまざまな生理・病的な条件下で、生細胞におけるカルシウムイオン濃度の変化をモニタリングする際に最適です。

 

 

特長 

• 高ダイナミックレンジのカルシウムインジケーター
• 細胞内で直接発現
• 補因子・基質は不要、その他、薬品を用いた染色も不要
• 高選択性かつ高感度
• 高輝度の蛍光でカルシウムイオン濃度変化に応答
• 生理的条件下のpHにおいても高輝度

 

 

性質

表1：Case12の性質

蛍光色	グリーン
Excitation max	491nm
Emission max	516nm
特異性	カルシウムイオン
Kd for Ca2+	1μM
pKa	7.2
分子量	46.4 kDa
ポリペプチド鎖長	415 aa
構造	モノマー
凝集性	なし
37℃での成熟	迅速

pCase12-cytoベクターの構造

 

図1：Case12のEx/Emデータ

Case12のカルシウムイオン存在、非存在下において標準化したEx/Emデータ（点線：非存在下、実線：1mM Ca²⁺存在）。Case12は、1mM Ca²⁺に応答し、蛍光強度が数倍上昇した。 

 

 

データ集 

イオノホアとEGTAを用いたカルシウムイオンに対するCase12の応答 

図2：HeLa細胞における最大のダイナミックレンジ

Case12ベクターをトランスフェクションしたHeLa細胞は、比較的弱いグリーン色の蛍光を示す(図2B)。20μMのカルシウムイオノホアA23187を添加（培地中のカルシウムイオン濃度：2mM）することにより、蛍光強度が5-6倍程度上昇した（図2AおよびC）。20mM EGTAを添加することで、Ca²⁺が除去され、蛍光シグナルがベースラインのレベルまで低下した（図2A）。
共焦点実験条件
Leica microscope DM IRE2, confocal TCS-SP2, objective HCX-PL-APO-63x/1.40-0.60/OIL.

 

Case12の蛍光強度とpHの関係

図3：カルシウムイオンの存在および非存在下におけるCase12蛍光のpH依存性 

従来のカルシウムセンサーは、低pH側における安定性が問題点とされてきた。汎用的なPericamのpKa(蛍光強度が最大蛍光強度の50%となるpH)は、8.0に達する。一方、Case12のpKaは、7.2(10μMのカルシウムイオン存在下)であり、G-CaMPの値に匹敵する。この比較的高いpH安定性は、Case12がin vivoでの使用においても適した性質を有することを示している。 

 

Case12のカルシウムイオンに対するKd値 

図4：カルシウムイオンタイトレーションカーブ 

Case12のカルシウムイオンに対するKd値は、生理的なカルシウムイオン濃度内の1μMである。 

 

生理的条件下におけるカルシウムイオン濃度のモニタリング 

図5：生理的条件下におけるカルシウムイオン変化のモニタリング

最終濃度100μMのATPを添加した条件下、Case12を発現する哺乳類細胞は、高ダイナミックレンジで、カルシウムイオンの濃度変化に応答した。この実験により、カルシウムイオン振動に対するCase12の蛍光応答は、迅速かつ可逆的であることが示されている。また、Case12は、生細胞において、nMレンジでカルシウムイオン濃度変化に応答することが証明された。

 

 

文献

1. Souslova et al. BMC Biotechnology, 7, 37 (2007).
2. Nagai et al. Proc Natl Acad Sci USA, 98, 3197-3202 (2001).
3. Nakai et al. Nat Biotechnol, 19, 137-141 (2001). 

 

 

価格表

製品名	メーカー製品番号	容量	オンラインカタログへ
pCase12-cyto	FP991	20μg

 

 

H₂O₂ sensor HyPer（過酸化水素インジケーター）

pHyPer-cyto、pHyPer-dMitoは、過酸化水素濃度の変化に応じて蛍光強度が変化する性質を有するHyPerタンパク質を発現するベクターです。本製品は、生細胞における過酸化水素の特異的なモニタリングに最適な蛍光タンパク質発現ベクターです。

 

 

特長 

• 細胞内過酸化水素のレシオ測定
• 過酸化水素の特異的な検出が可能
• 細胞内で直接発現
• 外来性の化合物や補因子不要
• 高選択性かつ高感度
• ROS（活性酸素）アーチファクトの産生なし 

 

 

性質 

表1：pHyPer製品ラインアップ

製品名	メーカー 製品番号	用途
pHyPer-cyto	FP941	哺乳類細胞の細胞質内でのHyPerの発現
pHyPer-dMito	FP942	哺乳類細胞のミトコンドリアでのHyPerの発現

 

pHyPer-cytoベクターの構造 

 

図1：HyPerのEx/Emデータ

Ex（図中、青色）、Em（図中、緑色）

 

 

データ集

Apo2L/TRAILを用いたアポトーシス誘導後の細胞質・ミトコンドリア内の過酸化水素産生の可視化

図2：Apo2/TRAILによるアポトーシス誘導時の細胞質イメージング

アポトーシス誘導中におけるHeLa細胞の細胞質発現型HyPer（緑色）とTMRM（赤色）の蛍光イメージ

 

図3：Apo2/TRAILによるアポトーシス誘導時の蛍光強度変化

アポトーシス誘導中におけるHeLa細胞の細胞質発現型HyPer（緑色）とTMRM（赤色）の蛍光強度の変化 

 

図4：Apo2/TRAILによるアポトーシス誘導時の細胞質およびミトコンドリアのイメージング

アポトーシス誘導中のHeLa細胞の細胞質（A-C）およびミトコンドリア（D-F）のHyPer（緑色）とTMRM（赤色）の蛍光イメージ
(A-C）：処理後、(A) : 176min、(B) : 200min、(C) : 240min
(D-F)：アポトーシスの間に一時的に脱分極したミトコンドリア内での過酸化水素レベルの上昇

 

図5：Hyper（緑色）およびTMRM（赤色）の蛍光強度

ミトコンドリア発現型HyPer（緑色）とTMRM（赤色）を用いたミトコンドリアの過酸化水素レベルと膜電位変化の解析

 

Apo2/TRAILによる誘導（図2-5）

①Apo2L/TRAIL(400ng/ml)でアポトーシス誘導を行うと、HeLa細胞の分解が観察された。処理後、3時間で細胞の形態は、平らな形状から原形質膜ブレブを形成し、円形の形態へと変化した。HyPer-cytoおよびTMRMを用いた結果、細胞質過酸化水素がミトコンドリアの膜電位の消失および細胞の形態変化と応答して、細胞質の過酸化水素が上昇することを確認した（図2、図3、図4A-C）。
②Apo2L/TRAIL処理したHeLa細胞のミトコンドリアにおける過酸化水素レベルの変化を調査するために、ミトコンドリアをターゲットとしたHyPerを使用した。処理後、1-2時間で、一部のミトコンドリアの膜電位が振動し始めた。一部のミトコンドリアは、膜電位の修復に従い一過性の消失を示した。脱分極したミトコンドリアでは過酸化水素レベルの上昇が確認された一方で、ミトコンドリアの膜電位の修復は、過酸化水素レベルの低下へと誘導した（図4D-F、図5）。

 

共焦点実験条件
図2-5：Changes in HyPer fluorescence were followed upon excitation by 4% intensity 488-nm light (emission at 500-520 nm) with simultaneous visualization of TMRM fluorescence upon excitation by 12% intensity 543 nm light (emission at 600-650 nm). Leica confocal system TCS SP2 on inverted microscope Leica DM IRE equipped with HCX PL APO lbd.BL 63x 1.4NA oil objective and 125 mW Ar and 1 mW HeNe lasers was used. Scanning was performed using 400 Hz line frequency, 512x512 format. Time series speed was 1 frame per 2 minutes.

 

Nerve Growth Factor(NGF)を用いた低レベル過酸化水素の検出 

図6：NGF刺激後の蛍光強度変化

NGF刺激後の細胞質発現型HyPerが過酸化水素応答に対して示す2種類のタイムコース（緑色および赤色）と未処理の細胞（青色）のタイムコース

 

NGFによる誘導（図6）

生理的な刺激により産生される低レベルの過酸化水素を検出するために、細胞質にHyPerを発現するPC-12細胞に対して、NGF処理を施した（同様の実験を4つ展開し、それぞれ22個の細胞について解析）。大半の細胞で、NGF添加後直ぐに過酸化水素レベルが上昇した。添加後、3-7分で最大値に到達し、10-20分で初期レベルへと減少した。また、ある種の細胞は、過酸化水素上昇に関して、Biphasic Kineticsを示した。このような細胞は、微量な初期の一過性の過酸化水素の上昇、引き続いてより高い過酸化水素レベルの上昇が生じ、急速な過酸化水素の上昇が生じた。後にHyPerの蛍光強度は初期レベルに到達した。

 

共焦点実験条件

図6：Changes in HyPer fluorescence were followed upon excitation by 4% intensity 488-nm light (emission at 500-520 nm). Leica confocal system TCS SP2 on inverted microscope Leica DM IRE equipped with HCX PL APO lbd.BL 63x 1.4NA oil objective and 125 mW Ar lasers was used. Scanning was performed using 400 Hz line frequency, 512x512 format. Time series speed was 1 frame per 3 seconds.

 

 

文献

1. Belousov et al. Genetically encoded fluorescent indicator for intracellular hydrogen peroxide. Nat Meth. 3(4), 281-286 (2006).
2. Choi et al. Structural basis of the redox switch in the OxyR transcription factor. Cell, 105, 103-113 (2001).
3. Gorman C. High efficiency gene transfer into mammalian cells. In DNA cloning: A Practical Approach, Vol. II. Ed. D. M. Glover. (IRL Press, Oxford, U.K.), 143-190 (1985).

 

 

価格表

製品名	メーカー製品番号	容量	オンラインカタログへ
pHyPer-cyto	FP941	20μg
pHyPer-dMito	FP942	20μg

 

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※記載の内容は、'09年10月現在の情報に基づいております。 

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