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モノクローナルTag抗体

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モノクローナルTag抗体

Tag抗体を用いることで、遺伝子組み換え技術を用いて人為的に導入したTag標識をもつタンパク質の検出や精製が容易となります。これらTag抗体を用いることで目的タンパク質に対する抗体を作製するという手間を省くことができ、タンパク質の局在、タンパク質間相互作用、タンパク質機能解析など多くの研究目的において利用されています。

 

 

製品ラインアップ

アガロース結合Tag抗体、POD標識Tag抗体はこちら

 

製品名をクリックすると各抗体の製品説明、使用例へ移動します。
製品名製品番号容量オンライン
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Anti-GFP(Mouse IgG1-κ),
Monoclonal(GF200), AS
04363-66 50 μg e-Nacalai.jpg
04363-24 200 μg
Anti-GFP(Rat IgG2a),
Monoclonal(GF090R), CC
04404-26 50 μg e-Nacalai.jpg
04404-84 200 μg
Anti-GST(Mouse IgG2a-κ),
Monoclonal(GS019), AS
04435-84 50 μg e-Nacalai.jpg
04435-26 200 μg
Anti-HA(Mouse IgG1-κ),
Monoclonal(HA124), AS
06340-96 50 μg e-Nacalai.jpg
06340-54 200 μg
Anti-6xHis(Mouse IgG1-κ),
Monoclonal(HI192), AS
04428-26 50 μg e-Nacalai.jpg
04428-84 200 μg
Anti-c-Myc(Mouse IgG1-κ),
Monoclonal(MC045), AS
04362-76 50 μg e-Nacalai.jpg
04362-34 200 μg
Anti-V5(Mouse IgG1-κ),
Monoclonal(V5005), AS
04434-94 50 μg e-Nacalai.jpg
04434-36 200 μg
貯法:冷蔵

 

 

Anti-GFP(Mouse IgG1-κ), Monoclonal(GF200), AS

製品説明
Clone GF200
Isotype IgG1-κ(Mouse)
Product form Liquid
Immunogen His-GFP(full length)fusion protein
Application Western Blotting 1:1,000-1:2,000
ELISA 1:2,000-1:20,000

 

使用例1
■ウェスタンブロッティング

GF200_WB_1.jpg

 

サンプル ①HeLa:GFP-H2A-Bbd
②HeLa:GFP-H2B
③HeLa

データご提供:
京都大学大学院医学研究科 先端領域融合医学研究機構 先端画像解析 教授 木村 宏 先生

 

使用例2
■ウェスタンブロッティング

GF200_WB_2.jpg

 

サンプル タンパク質抽出液 シロイヌナズナ芽生え(10mg)
①Non-transformants(Control)
②Transformants(小胞体局在型GFP)
一次抗体 Anti-GFP(Mouse IgG-κ)(1:5,000)
二次抗体 Anti-Mouse IgG-HRP(1:2,000)

データご提供:
京都大学大学院理学研究科 植物分子細胞生物学 助手 嶋田 知生 先生

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Anti-GFP(Rat IgG2a), Monoclonal(GF090R), CC

製品説明
Clone GF090R
Isotype IgG2a(Rat)
Product form Liquid
Immunogen His-GFP(full length)fusion protein
Application Immunohistochemistry 1:1,000-1:2,000
Western Blotting 1:1,000-1:2,000
ELISA 1:2,000-1:20,000

 

使用例1
■免疫組織染色

GF090R_IHC.jpg

 

細胞膜移行シグナルを付加したEGFPを、Anti-GFP(Rat IgG2a)モノクローナル抗体で組織染色したものです。

サンプル マウス脳(副嗅球の神経細胞)
一次抗体 Anti-GFP(Rat IgG2a), Monoclonal(1:1,000) 室温 over night
二次抗体 Anti-Rat IgG-Cy3(1:300) 室温 1hr
ブロッキング 5% normal goat serum / 0.2% TritonX-100 in PBS
固定法 4% パラホルムアルデヒド

データご提供:
理化学研究所 脳科学総合研究センター シナプス分子機構研究チーム 吉原 良浩 チームリーダー

 

使用例2
■ウェスタンブロッティング

GF090R_WB.jpg

 

サンプル ①GFP
②GFP-14-3-3
(293 cell lysate 50μg)
ゲル 5-20% Gradient Gel
一次抗体 Anti-GFP(Rat IgG2a), Monoclonal(3μg/ml) over night
二次抗体 Anti-Rat IgG-HRP(1:10,000)

データご提供:
東京医科歯科大学 難治疾患研究所 分子遺伝分野 吉田 清嗣 准教授

 

 

使用文献
  1. Yonehara, K. Spatially asymmetric reorganization of inhibition establishes a motion-sensitive circuit. Nature. 469(7330), 407-10 (2011).
  2. Abe, K. et al. Loss of Heterochromatin Protein 1 Gamma Reduces the Number of Primordial Germ Cells via Impaired Cell Cycle Progression in Mice. Biol Reprod 85(5), 1013-24 (2011).
  3. Hide, T. et al. Combination of a ptgs2 inhibitor and an epidermal growth factor receptor-signaling inhibitor prevents tumorigenesis of oligodendrocyte lineage-derived glioma-initiating cells. Stem Cells. 29(4), 590-9 (2011).
  4. Kurita, S. et al. Cooperative Role of Nectin-Nectin and Nectin-Afadin Interactions in Formation of Nectin-based Cell-Cell Adhesion. J Biol Chem. 286(42), 36297-303 (2011).
  5. Wang, X. et al. Loss of adenomatous polyposis coli in Bergmann glia disrupts their unique architecture and leads to cell nonautonomous neurodegeneration of cerebellar Purkinje neurons. Glia. 59(6), 857-68 (2011).
  6. Mochizuki, N. Intravenous injection of neural progenitor cells improves cerebral ischemia-induced learning dysfunction. Biol Pharm Bull. 34(2), 260-5 (2011).
  7. Inamura, N. et al. Olig2 lineage cells generate GABAergic neurons in the prethalamic nuclei, including the zona incerta, ventral lateral geniculate nucleus and reticular thalamic nucleus. Dev Neurosci. 33(2), 118-29 (2011).
  8. Vidaki, M. et al. Rac1-Dependent Cell Cycle Exit of MGE Precursors and GABAergic Interneuron Migration to the Cortex. Cereb Cortex. (2011).
  9. Konno, A. et al. Evaluation of a Sindbis virus vector displaying an immunoglobulin-binding domain: Antibody-dependent infection of neurons in living mice. Neurosci Res. (2011).
  10. Gotoh, H. et al. Genetically-defined lineage tracing of Nkx2.2-expressing cells in chick spinal cord. Dev Biol. 349(2), 504-11 (2011).
  11. Rubin, AN. et al. The germinal zones of the basal ganglia but not the septum generate GABAergic interneurons for the cortex. J Neurosci. 30(36), 12050-62 (2010).
  12. Matsumoto, H. et al. Spatial arrangement of glomerular molecular-feature clusters in the odorant-receptor class domains of the mouse olfactory bulb. J Neurophysiol. 103(6), 3490-500 (2010).
  13. Tamura, H. et al. Atg9A Protein, an Autophagy-related Membrane Protein, Is Localized in the Neurons of Mouse Brains. J Histochem Cytochem. 58(5), 443-53 (2010).
  14. Asai, R. et al. Endothelin receptor type A expression defines a distinct cardiac subdomain within the heart field and is later implicated in chamber myocardium formation. Development. 137(22), 3823-33 (2010).
  15. Hirota, Y. et al. Planar polarity of multiciliated ependymal cells involves the anterior migration of basal bodies regulated by non-muscle myosin II. Development. 137(18), 3037-46 (2010).
  16. Honma, Y. et al. Axonal projections of mechanoreceptive dorsal root ganglion neurons depend on Ret. Development. 137(14), 2319-28 (2010).
  17. Kohyama, J. BMP-induced REST regulates the establishment and maintenance of astrocytic identity. J Cell Biol. 189(1), 159-70 (2010).
  18. Manno, A. et al. Enhanced ATPase activities as a primary defect of mutant valosin-containing proteins that cause inclusion body myopathy associated with Paget disease of bone and frontotemporal dementia. Genes Cells. 15(8), 911-22 (2010).
  19. Mains, RE. et al. Kalrn promoter usage and isoform expression respond to chronic cocaine exposure. BMC Neurosci. 12, 20 (2011). 

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Anti-GST(Mouse IgG2a-κ), Monoclonal(GS019), AS

製品説明
Clone GS019
Isotype IgG2a-κ(Mouse)
Product form Liquid
Immunogen Glutathione S-Transferase(GST)
Application Western Blotting 1:1,000-1:2,000
Immunoprecipitation 1:400-1:1,000
ELISA 1:2,000-1:20,000

 

使用例
■ウェスタンブロッティング

GS019_WB_1.jpg

 

サンプル ①GST発現大腸菌粗抽出物
②Glutathione Sepharose素通り画分
③Glutathione Sepharose吸着画分
ゲル 12.5% SDS-PAGE
ブロッキング Blocking One(Nacalai Tesque) 室温 1hr
一次抗体 Anti-GST(Mouse IgG2a-κ),(GS019)(1:2,000 with Blocking One) 室温 1hr
洗浄 TBS-T 5min×3
二次抗体 Anti-Mouse Ig-HRP(1:1,000 with TBS-T) 室温 30min
洗浄 TBS-T 5min×3
検出 Luminol Reagent(Santa Cruz)

データご提供:
東京大学医科学研究所 免疫病態分野 清水 宣明 先生

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Anti-HA(Mouse IgG1-κ), Monoclonal(HA124), AS

製品説明
Clone HA124
Isotype IgG1-κ(Mouse)
Product form Liquid
Immunogen Glutathione-S-Transferase(GST)-HA [YPYDVPDYA-COOH] fusion protein.
Application Western Blotting(Chemiluminescence) 1:10,000-1:30,000
ELISA 1:2,000-1:20,000

 

使用例1
■ウェスタンブロッティング

HA124_WB.jpg

 

サンプル

E.coli lysate
②abcam社(#ab5395)* 250ng
③Pierce(#23613)* 20ng
④Pierce(#23613)* 100ng
⑤M.W. Marker

*abcam社(#ab5395):
ペプチド鎖中にHA-tagペプチドが挿入された発現タンパク質
NH2-(GST)(T7)(HSV)(c-myc)(VSV)(Glu-Glu)(V5)(E-tag)(DDDDK)(S-tag)(HA)(6xHis)-COOH

*Pierce(#23613):
GSTのC末端ペプチドにHA-tagペプチドが結合した発現タンパク質
NH2-(GST)(HA)-COOH

一次抗体 Anti-HA(Mouse IgG1-κ), Monoclonal(HA124), AS(2mg/ml)(1:10,000) 60min
二次抗体 Anti-Mouse IgG(Rat IgG), Monoclonal cocktail, CC, POD Conjugated(1:25,000) 60min
検出 Chemi-Lumi One 1min

 

使用例2
■免疫沈降(サンプルのSDS-PAGE、銀染色検出像)

HA124_IP.jpg

 

サンプル

①clarified bacterial lysate +

HA-tagged GST 1μg +

Anti-HA(Mouse IgG1-κ), Monoclonal(HA124), AS 5μg +

Protein G Agarose(50% suspention) 0.05ml

E.coli lysate + Pierce(#23613) 1μg

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Anti-6xHis(Mouse IgG1-κ), Monoclonal(HI192), AS

製品説明
Clone HI192
Isotype IgG1-κ(Mouse)
Product form Liquid
Immunogen 6xHis synthetic peptide [HHHHHH] conjugated with KLH
Application Western Blotting 1:1,000-1:2,000
ELISA 1:2,000-1:20,000

 

使用例
■ウェスタンブロッティング

HI192_WB.jpg

 

サンプル

lysate from Sf9 cells in which His-tagged Drosophila PTEN is expressed

フィルター FluoroTrans[PALL]
ブロッキング 5% non-fat dry milk/PBS 30min
一次抗体

Anti-6xHis(Mouse IgG1-κ), Monoclonal(HI192)

洗浄 0.25% Tween-20/TBS 10min×3
二次抗体 Anti-Mouse IgG-HRP(1:1,000)/2% BSA/0.25% Tween-20/TBS 30min
洗浄 0.25% Tween-20/TBS 10min×5
検出 Luminol Reagent(Santa Cruz)

データご提供:
東京都臨床医学総合研究所 薬理研究部門 前濱 朝彦 先生

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Anti-c-Myc(Mouse IgG1-κ), Monoclonal(MC045), AS

製品説明
Clone MC045
Isotype IgG1-κ(Mouse)
Product form Liquid
Immunogen c-Myc synthetic peptide [EQKLISEEDL] conjugated with KLH
Application Western Blotting 1:1,000-1:2,000
Immunoprecipitation 1:400-1:1,000
Immunocytochemistry 1:100-1:200
ELISA 1:2,000-1:20,000

 

使用例1
■免疫細胞化学

MC045_ICC_1.jpg

 

Mycタグを付けたTCP1βを神経系培養細胞SH-SY5Y cellに遺伝子導入し、遺伝子を発現した細胞をMouse Anti-Myc抗体(MC045, AS 2.5mg/ml, 200倍希釈)およびProtein Xに対する特異的抗体でインキュベーションした。二次抗体は、Alexa Fluor 488(緑)および546(赤)標識抗体(400倍希釈)を使用し二重染色した。観察は共焦点レーザー顕微鏡でおこなった。TCP1βとProtein Xの局在は、一部一致することが確認された。

 

データご提供:
理化学研究所 脳科学総合研究センター 運動系神経変性研究チーム 今居 譲 先生

 

 

使用例2
■免疫細胞化学

MC045_ICC_2.jpg

 

細胞 HEK293T
抗体 Anti-c-Myc(Mouse IgG1-κ), Monoclonal(MC045), AS(1:200)

データご提供:
埼玉医科大学 薬理学教室 斎藤 祐見子 先生

  

使用例3
■免疫細胞化学

MC045_ICC_3.jpg

 

内在性のhnRNP A1は核小体を除く核内(核質)に存在し、このmycタグのものと同じ局在を示す。

 

サンプル

N末端にmycタグをつけたhnRNP A1をHeLa細胞で発現させたもの

一次抗体

Anti-c-Myc(Mouse IgG1-κ)(1:1,000)

二次抗体 FITC-conjugated goat affinity purified F(ab')2 Fragment to mouse IgG(Whole molecule) (1:200)
固定法 2% ホルムアルデヒド in PBS 室温 30min
Permeabilization アセトン -20℃ 3min
ブロッキング 3% BSA in PBS 室温

データご提供:
京都大学ウイルス研究所 情報高分子化学研究所 片岡 直行 先生

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Anti-V5(Mouse IgG1-κ), Monoclonal(V5005), AS

製品説明
Clone V5005
Isotype IgG1-κ(Mouse)
Product form Liquid
Immunogen V5 synthetic peptide [GKPIPNPLLGLDST] conjugated with KLH
Application Western Blotting 1:1,000-1:2,000
Immunoprecipitation 1:400-1:1,000
ELISA 1:2,000-1:20,000

 

使用例
■ウェスタンブロッティング・免疫沈降

V5005_WB_1.jpg

 

(A)pCDNA dest40-VE-cad.を293T細胞にりん酸カルシウム法を用いて導入し、C末端にV5タグを持つVE-cadherinを発現させた。そのlysateをSDS-PAGEにより分離、PVDF膜にトランスファーしたあと5,000倍希釈の抗V5抗体でウェスタンブロッティングを行った。

 

V5005_WB_2.jpg

 

(B)(A)のlysateを抗V5抗体(1μl)を用いて免疫沈降を行った。その後、免疫沈降物をSDS-PAGEにより分離、PVDF膜にトランスファーしたあと2,000倍希釈の抗V5抗体でウェスタンブロッティングを行った。矢印は、VE-cad.-V5のバンドを示している。

 

 

※記載の内容は、'17年1月現在の情報に基づいております。

※研究者の皆様のご所属などは、データご提供時の情報に基づいております。


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