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SDS-PAGE用中性プレキャストゲル~使い勝手の良い13ウェル、17ウェルに変更~Extra PAGE One Precast Gel

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使い勝手の良い13ウェル、17ウェルに変更
Extra PAGE One Precast Gel

Extra PAGE One Precast Gelは、従来の製品と比較し分離能やウェスタンブロッティング時の転写効率に優れているミニゲルサイズの扱いやすいSDS-PAGE用中性プレキャストゲルです。この度、ウェル数を、使い勝手の良い13ウェル、17ウェルに変更しました。

 

特長
  • 優れた分離能
  • バンドがシャープ
  • ウェスタンブロッティングでの高い転写効率
  • 従来SDS-PAGE法(Laemmli法)の泳動緩衝液、試料緩衝液を使用可能
  • マルチチャンネルピペットの使用が可能(17ウェルタイプのみ対応)
性能比較1

■分離能の比較

他社製品と同等以上の分離能を示します。特に5-20%のグラジエントゲルや12.5%の均一ゲルでの比較例では、低分子側の分離能に優れることが示されています。

ゲルグラジエントゲル
製品名 Extra PAGE One C社 Extra PAGE One D社
ゲル% 5-20% 4-20% 5-20% 5-20%
製品番号 13063-74 - 13067-74 -
泳動像 bunrinou_EPO_G_vs_C__150422.jpg bunrinou_G_C__150422.jpg bunrinou_EPO_G_vs_D__150422.jpg bunrinou_G_D__150422.jpg
<サンプル> Protein Markers(10×)(製品番号:29458-24)を1×溶液に調製し、5μl添加。
<染色> CBB Stain One(製品番号:04543)
<電気泳動条件> Extra PAGE One 300V(定電圧)、約50分間、C社、D社製品は推奨条件に準じています。
ゲル均一ゲル
製品名 Extra PAGE One C社
ゲル% 12.5% 12.5%
製品番号 13073-44 -
泳動像 bunrinou_EPO_kin_vs_C___150422.jpg bunrinou_kin_C__150422.jpg
<サンプル> Protein Markers(10×)(製品番号:29458-24)を1×溶液に調製し、5μl添加。
<染色> CBB Stain One(製品番号:04543)
<電気泳動条件> Extra PAGE One 300V(定電圧)、約50分間、C社製品は推奨条件に準じています。

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性能比較2

■転写効率の比較-1 

Extra PAGE Oneは、C社製品より転写効率が高いことが高分子側および低分子側の矢印のタンパク質で示されました。

tensyakouritunohikaku-1_150422.jpg
<サンプル>

①Protein Ladder One(Triple color)(製品番号:09547-74)

②Protein Markers(3×) 2μl添加

③Protein Markers(1×) 2μl添加

④Protein Markers(1/3) 2μl添加

⑤Bio-Rad社Precision Plus Protein™ Kaleidoscope™10μl添加

<転写> セミドライウェスタンブロッティング用転写緩衝液(製品番号:30650-31)を使用(10V定電圧で転写時間20分)
<染色> CBB Stain One(製品番号:04543)によりPVDFメンブレンを染色

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性能比較3

■転写効率の比較-2

Extra PAGE Oneは、D社製品では転写効率が低い高分子領域のタンパク質(矢印)も高い転写効率を示しました。

tensyakouritunohikaku-2_150422.jpg
<サンプル>

①Protein Markers(3×) 2μl添加

②Protein Markers(1×) 2μl添加

③Protein Markers(1/3) 2μl添加

<転写> セミドライウェスタンブロッティング用転写緩衝液(製品番号:30650-31)を使用(10V定電圧で転写時間20分)
<染色> CBB Stain One(製品番号:04543)によりPVDFメンブレンを染色。

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 製品ラインアップ

下記の種類のグラジエントゲルと均一ゲルを用意しています。

ゲルグラジエントゲル
ゲル% 5-10% 5-15% 5-20% 7.5-15% 10-20%

製品番号
13ウェル
17ウェル

 
13059-44
13060-04

 
13061-94
13062-84

 
13063-74
13064-64

 
13065-54
13066-44

 
13067-34
13068-24

泳動像 lineup_G_5-10__150422.jpg lineup_G_5-15__150422.jpg lineup_G_5-20_150422.jpg lineup_G_75-15_150422.jpg lineup_G_10-20_150422.jpg
ゲル均一ゲル
ゲル% 7.5% 10% 12.5% 15%

製品番号
13ウェル
17ウェル

 
13069-14
13070-74
 
13071-64
13072-54
 
13073-44
13074-34
 
13075-24
13076-14
泳動像 lineup_K_75_150422.jpg lineup_K_10_150422.jpg lineup_K_125_150422.jpg lineup_K_15_150422.jpg
注)弊社Rapid Stain CBB Kit(製品番号 :30035-14)等の一部のCBB染色液で、バックグラウンドが薄く残る場合があります。このような場合は、10%酢酸で20分間程度洗浄すると、バックグラウンドはさらに下がります。

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製品仕様
プレート W100mm×H100mm×T3.2mm(ガラス製)
ゲルサイズ W80mm×H80mm×T1.0mm
ウェル数(アプライ量) 13ウェル(40μl)、17ウェル(28μl)

注)W100mm×H100mm×T3.2mmのサイズのプレートが使用可能な泳動装置を使用してください。

 

■マルチチャンネルピペット対応(17ウェルタイプのみ対応)

Extra PAGE Oneは、マルチチャンネルピペット対応で多検体サンプルの分析が迅速にできます。

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適応データ

■MSへの適応

(データご提供:近畿大学 農学部 応用生命化学科 森山 達哉 教授 / 吉村 征浩 博士研究員)

Extra PAGE Oneは、CBB染色や銀染色などの染色に問題無く使用できるだけで無く、ゲルから切り出したバンドをMS解析に利用する際にも問題無くご利用いただけます。

●10%均一ゲル 
 P3-ms-10%.jpg
 ●Extra PAGE One 7.5-15%ゲル
 P3-ms-ExtraPageOne75-15%.jpg
ウシ血清アルブミン(製品番号:01859)をSDS化し、10%均一ゲルもしくはExtra PAGE One 7.5-15%ゲルを用いてSDS-PAGEに供した。泳動後のゲルはネガティブ染色キットSDS-PAGE用(製品番号:16660-41)を用いて染色しバンドを確認した。切り出したタンパク質のバンドを含んだゲルを染色キットに含まれる洗浄バッファーで洗浄した後、ゲル中のタンパク質を還元、アルキル化したのち、30℃にて一晩、トリプシンで消化した。トリプシン消化されたペプチドをC18 Tipにより脱塩後、MALDI-MS解析を行った。その結果、いずれのゲルを用いた場合でも明瞭なBSA由来のペプチド断片が検出された。

 

■MS/MSへの適応

(データご提供:京都市産業技術研究所 加工技術グループ バイオチーム 泊 直宏 様)

●泳動結果 ●バンド2のMS/MS解析データ
 P3-msms-eidou.jpg  P3-msms-band-2.jpg
データ左:レーンA:Protein Ladder One, Triple-color(製品番号:09547-74)、レーンB:BSAをExtra PAGE One 5-20%ゲルを用いて、SDS-PAGEに供した。SDS-PAGEの2、3、5、6、7、10のバンドについてMS解析を行った。以下では、バンド2、6、10について取り上げ説明する。データ右:ここでは、バンド2のタンパク質のMS/MS解析の結果を示しており、Glutamate-ammonia-ligaseと同定された。
●バンド6のMS/MS解析データ ●バンド10のMS/MS解析データ
P3-msms-band-10.jpg
同様にバンド6および10についてもMS/MS解析を行った。得られた推定アミノ酸の配列によりタンパク質を同定した結果、バンド6のタンパク質は、3-dehydroquinate synthase、バンド10のタンパク質はmoaDと同定された。同様に、その他のバンドもMS/MS解析により同定が可能であった。以上の結果より、Extra PAGE Oneにより分離したタンパク質は、高分子側から低分子側のタンパク質に至るまで、MS/MS解析に問題無く適応できた。

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価格表
製品名ウェル数製品番号価格オンライン
カタログへ
Extra PAGE One Precast Gel 5-10% 13 13059-44 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 5-10% 17 13060-04 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 5-15% 13 13061-94 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 5-15% 17 13062-84 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 5-20% 13 13063-74 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 5-20% 17 13064-64 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 7.5-15% 13 13065-54 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 7.5-15% 17 13066-44 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 10-20% 13 13067-34 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 10-20% 17 13068-24 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 7.5% 13 13069-14 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 7.5% 17 13070-74 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 10% 13 13071-64 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 10% 17 13072-54 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 12.5% 13 13073-44 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 12.5% 17 13074-34 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 15% 13 13075-24 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 15% 17 13076-14 18,500 e-Nacalai.jpg

規格:SP 貯法:冷蔵 容量:10 sheets

 

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電気泳動関連機器

eidousou.jpg

 

メーカー名 Gellex International社
製品名 WEP-Nバーティカル高速泳動槽
メーカー製品番号 WEP-N
外寸法 154W×88D×146H(mm)リムーブガイド含まず
バッファー量 800ml
価格 65,000
電気泳動槽には、Bullet PAGE One用のアダプター(100mm×80mm)およびExtra PAGE One用のアダプター(100mm×100mm)の両方が付属されています。

 

powersupply.jpg

 

メーカー名 Major Science社
製品名 Mini Pro 500V Power Supply
製品番号 Mini-500
出力電圧 10-500V / 1V
出力電流 10-400mA / 1mA
出力電力 120W
出力タイプ 定電圧もしくは定電流
コントロール マイクロプロセッサ コントローラ
出力端子 2組
タイマー 1-999分(アラームあり)
安全機能 無負荷・漏電・過重電流検知/過熱防止
動作温度 4-40℃
寸法 140×191×84 (mm)
構成素材 ポリカーボネート/アルミナムベースプレート
重量 約1kg
価格 88,000

約10分で電気泳動が可能な超高速プレキャストゲルBullet PAGE One Precast Gelを販売しています。
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※記載の内容は、'15年4月現在の情報に基づいております。


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