蛍光染色用の封入剤
Fluoro-KEEPER Antifade Reagent, Non-Hardening Type
本製品は独自の退色防止剤を含有した非固化タイプの封入剤であり、蛍光顕微鏡観察時に起こる蛍光の急激な退色を防止します。また、カバーガラスの端をマニュキュア等でシーリングした標本は数週間の保存も可能です。
特長
- さまざまな蛍光色素に対し、優れた退色防止効果を発揮
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- 使いやすいドロッパーボトルを採用
実施例
蛍光色素を用いたプラナリア標本の観察
・Hoechst33342並びにAlexa Fluor® 488、Alexa Fluor® 594標識抗体を用いた染色画像
（サンプル：プラナリア）
・繰り返し撮影後の蛍光強度の変化
撮影1回目の蛍光強度を100%とした時の繰り返し撮影後の各蛍光強度（％）
| 核 | Hoecst 33342 |
|---|---|
| Arrestin &G Protein β Subunit(Gβ) |
一次抗体：Mouse Anti-planarian Arrestin,Mouse Anti-planarian Gβ 二次抗体：Alexa Fluor® 488 Goat Anti-mouse IgG |
| Tryptophan β Hydroxylase(TPβH) |
一次抗体：Rabbit Anti-planarian TPβH 二次抗体：Alexa Fluor® 594 Goat Anti-rabbit IgG |
データご提供：
京都大学大学院理学研究科生物科学専攻 高次情報形成学講座 生体情報発生分野 分子発生学分科 阿形 清和 教授 / 井上 武 助教
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共焦点レーザー走査型顕微鏡（Olympus FV10）にて蛍光染色を行ったプラナリアを撮影しました。60回撮影後でも鮮明に検出されています。
性能確認1
さまざまな蛍光色素に対する退色防止効果
| 蛍光色素 | Fluoro-KEEPER | A社製品 | Control |
|---|---|---|---|
| Hoechst 33258 | 98 | 94 | 96 |
| Hoechst 33342 | 100 | 98 | 90 |
| DAPI | 99 | 99 | 93 |
| Fluorescein | 97 | 96 | 49 |
| Alexa Fluor® 488 | 94 | 93 | 86 |
| CF™ 488 | 93 | 93 | 82 |
| Cy® 2 | 99 | 0* | 83 |
| Rhodamine | 72 | 88 | 51 |
| Alexa Fluor® 555 | 98 | 97 | 81 |
| CF™ 555 | 98 | 99 | 85 |
| Cy® 3 | 89 | 88 | 71 |
| Propidium iodide | 95 | 94 | 67 |
各蛍光色素で染色した細胞を、それぞれControl（85％グリセリン含有PBS）、本製品、A社製品（非固化タイプ）で封入した。1分間の励起光照射により各蛍光色素を退色させ、退色防止効果を検討した。
上表の数値は励起光照射開始時の蛍光強度を100％とした時の励起光1分間照射後の蛍光強度（％）。
*Ａ社製品はCy®2の光を著しく減弱させるため、観察開始時 および励起光1分後照射後の蛍光強度が共に測定できず。
装置：落射蛍光顕微鏡（Olympus BX-50-34-FLA1）
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本製品はさまざまな蛍光色素に対し、優れた退色防止効果を発揮することが示されています。
性能確認2
| サンプル： | MC3T3-E1細胞（固定：4％パラホルムアルデヒドりん酸緩衝液（#09154）室温15分処置） |
|---|---|
| ブロッキング： | ブロッキングワンHisto（#06349） |
| 一次抗体： | Anti-vimentin Rabbit Polyclonal Antibody(Santa Cruz：#sc-7557R) |
| 二次抗体： | CF™ 488A Goat Anti- rabbit IgG(H+L), D(ab')2 Fragment(Biotium：#20013) CF™ 555 Goat Anti- rabbit IgG(H+L)(Biotium：#20033) |
| 核染色： | DAPI(#11034) or Hoechst33258(#04907) |
（長期保存を行う場合は、標本のカバーガラスをマニキュア等でシーリングし、4℃で遮光して保存してください。）
使用方法
-
標本から余分な液を取り除き、本製品を１～２滴ほど滴下してください。
-
標本をカバーガラスによりカバーしてください。
-
封入後すぐに観察が可能です。
使用上の注意
本製品はグリセリンを使用しているため、蛍光タンパク質であるフィコエリスリン、アロフィコシアニンなどのフィコビリタンパク質の観察には適していません。
価格表
| 製品名 | 規格 | 貯法 | 製品番号 | 容量 | 価格 |
|---|---|---|---|---|---|
|
Fluoro-KEEPER Antifade Reagent, Non-Hardening Type |
SP |
冷蔵 | 12593-64 | 2x5 ml |  |
※記載の内容は、'14年3月現在の情報に基づいております。