CRISPR/Cas9はゲノム編集の最新技術です。高い特異性と低い細胞毒性で、特定のゲノムを切断したり、置換することが可能です。CRISPR/Cas9ゲノム編集システムは、ヒトU6ポリメラーゼIIIプロモーターから発現されるguide RNAとCas9タンパク質の共発現を必要とします。ゲノム上の標的配列の3'末端側に存在するNGG配列（PAM：protospacer-adjacent motif）を目印として、Cas9は標的配列に相補的なguide RNAにより標的配列を認識して複合体を形成し、PAM配列より上流の二本鎖DNAを切断します。
OriGene社では、guide RNAとCas9タンパク質を共発現するプラスミドベクターを提供しています。ラインアップとして、設計したguide RNA配列をプラスミドベクターに挿入する方法の違いで、クローニング用に突出末端を持つようにカットされたpre-cut pCas-Guide（pCas-Guide Cloning Kit）、制限酵素BamH I/BsmB Iサイトを持つpCas-Guideの2種類から選択いただけます。
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メーカー情報
Cas9 based genome editing has become a popular tool for targeted genome manipulation because of its simplicity and high cutting efficiency. This system requires a functional cas9 protein and a guide RNA for effective double-stranded breakage at a desired site. OriGene has developed the pCas-Guide system, a dual-function vector with both guide RNA and Cas9 expression. OriGene also designed a set of donor cassettes for construction of donor vectors. These include Luciferase-Loxp-Puro-Loxp, tGFP-Loxp-Puro-Loxp and tRFP-Loxp-BSD-Loxp.
■ pre-cut pCas-Guide（pCas-Guide Cloning Kit）
The pCas-Guide vector is designed for cloning a guide RNA insert for genome editing purpose. The vector also has a CMV-driven codon-optimized Cas9. When co-transfected with a proper donor DNA, targeted genome editing can be achieved. The vector retains the ampicillin resistance gene for the selection of E. coli transformants. The vector is supplied as a precut vector, ready for insert ligation. This system has been successfully validated in multiple cases of genome editing.
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■ pCas-Guide
The pCas-Guide vector is designed for cloning a guide RNA insert for genome editing purpose. Target sequence can be cloned into the vector via BamH I and BsmB I sites. The vector also expresses a CMV-driven codon-optimized Cas9. When co-transfected with a proper donor DNA, targeted genome editing can be achieved. The vector retains the ampicillin resistance gene for the selection of E. coli transformants.
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