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SDS-PAGE用中性プレキャストゲル Extra PAGE One Precast Gel

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SDS-PAGE用のプレキャストゲルの販売を開始します。本製品は、従来の製品と比較し分離能やウェスタンブロッティング時の転写効率に優れているミニゲルサイズの扱いやすいプレキャストゲルです。
特長
  • 優れた分離能
  • バンドがシャープ
  • ウェスタンブロッティングでの高い転写効率
  • 長期保存(9ヶ月)が可能
  • 従来SDS-PAGE法(Laemmli法)の泳動緩衝液、試料緩衝液を使用可能
性能比較1

■分離能の比較

他社製品と同等以上の分離能を示します。特に5~20%のグラジエントゲルや12.5%の均一ゲルでの比較例では、低分子側の分離能に優れることが示されています。

ゲルグラジエントゲル
製品名 Extra PAGE ONE A社 Extra PAGE ONE B社
ゲル% 5~20% 4~20% 5~20% 5~20%
製品番号 11955-54 - 11955-54 -
泳動像 bunrinou_EPO_G_vsA.jpg bunrinou_G_A.jpg bunrinou_EPO_G_vsB.jpg bunrinou_G_B.jpg
<サンプル> Protein Markers(10×)(製品番号:29458) を1×溶液に調製し、5ul添加。
<染色> CBB Stain One(製品番号:04543)
<電気泳動条件> Extra PAGE ONE 30mA(定電流)、約50分間、A社、B社は推奨条件に準じています。
ゲル均一ゲル
製品名 Extra PAGE ONE A社
ゲル% 12.5% 12.5%
製品番号 11965-24 -
泳動像 bunrinou_EPO_kin_vsA.jpg bunrinou_kin_A.jpg
<サンプル> Protein Markers(10×)(製品番号:29458) を1×溶液に調製し、5ul添加。
<染色> CBB Stain One(製品番号:04543)
<電気泳動条件> Extra PAGE ONE 30mA(定電流)、約50分間、A社は推奨条件に準じています。

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性能比較2

■転写効率の比較-1 

Extra PAGE One Precast Gelは、A社製品より転写効率が高いことが高分子側および低分子側の矢印のタンパク質で示されました。

P1_tensyakouritumohikaku-1.jpg
<サンプル>

①Protein Ladder One(Triple color) (製品番号:09547)

②Protein Markers(3×) 2ul添加

③Protein Markers(1×) 2ul添加

④Protein Markers(1/3) 2ul添加

⑤Bio-Rad社Precision Plus Protein™ Kaleidoscope™10ul添加

<転写> セミドライウェスタンブロッティング用転写緩衝液(製品番号:30650-31)を使用
(10V定電圧で転写時間20分)
<染色> CBB Stain One(製品番号:04543)によりPVDFメンブレンを染色

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性能比較3

■転写効率の比較-2

Extra PAGE One Precast Gelは、B社製品では転写効率が低い高分子領域のタンパク質(矢印)も高い転写効率を示しました。

 P2tensyahikaku2.jpg

<サンプル>

①Protein Markers(3×) 2ul添加

②Protein Markers(1×) 2ul添加

③Protein Markers(1/3) 2ul添加

<転写> セミドライウェスタンブロッティング用転写緩衝液(製品番号:30650-31)を使用
(10V定電圧で転写時間20分)
<染色> CBB Stain One(製品番号:04543)によりPVDFメンブレンを染色。

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 製品ラインアップ

下記の種類のグラジエントゲルと均一ゲルを用意しています

ゲルグラジエントゲル
ゲル% 5~10% 5~20% 7.5~15% 10~20%
分画範囲 35~450K 10~350K 15~300K 8~200K

製品番号

12wells/16wells

11953-74/

11954-64

11955-54/

11956-44

11957-34/

11958-24

11959-14/

11960-74

泳動像 P2-rainup-G-5-10.jpg P2-rainup-G-5-20.jpg P2-rainup-G-75-15.jpg P2-rainup-G-10-20.jpg
ゲル均一ゲル
ゲル% 7.5% 10% 12.5% 15%
分画範囲

40~350K

25~250K

15~200K

10~150K

製品番号

12wells/16wells

11961-64/

11962-54

 11963-44/

11964-34

 11965-24/

11966-14

11967-04/

11968-94

泳動像 P2-rainup-K-75.jpg P2-rainup-K-10.jpg P2-rainup-K-125.jpg P2-rainup-K-15.jpg
注)弊社Rapid Stain CBB Kit(製品番号 :30035-14)等の一部のCBB染色液で、バックグラウンドが薄く残る場合があります。このような場合は10%酢酸で、20分間程度洗浄するとバックグラウンドはさらに下がります。

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製品仕様
プレート: W100mm×H100mm×T3.2mm(ガラス製)
ゲルサイズ: W80mm×H80mm×T1.0mm
Well: 12wells、16wells
有効期間: 9ヶ月

注)泳動装置はプレートサイズがW100mm×H100mm×T3.2mmに使用できる装置をご使用ください。

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適応データ

■MSへの適応

(データご提供:近畿大学農学部 応用生命化学科 森山 達哉 准教授 吉村 征浩 博士研究員)

Extra PAGE Oneは、CBB染色や銀染色などの染色に問題無く使用できるだけで無く、ゲルから切り出したバンドをMS解析に利用する際にも問題無くご利用いただけます。

●10%均一ゲル 
 P3-ms-10%.jpg
 ●Extra PAGE One 7.5-15%ゲル
 P3-ms-ExtraPageOne75-15%.jpg
ウシ血清アルブミン(製品番号:01859)をSDS化し、10%均一ゲルもしくはExtra PAGE One 7.5-15%ゲルを用いてSDS-PAGEに供した。泳動後のゲルはネガティブ染色キットSDS-PAGE用(製品番号:16660-41)を用いて染色しバンドを確認した。切り出したタンパク質のバンドを含んだゲルを染色キットに含まれる洗浄バッファーで洗浄した後、ゲル中のタンパク質を還元、アルキル化したのち、30℃にて一晩、トリプシンで消化した。トリプシン消化されたペプチドをC18 Tipにより脱塩後、MALDI-MS解析を行った。その結果、いずれのゲルを用いた場合でも明瞭なBSA由来のペプチド断片が検出された。

■MS/MSへの適応

(データご提供:京都市産業技術研究所加工技術グループバイオチーム 泊 直宏 様)

●泳動結果 ●バンド2のMS/MS解析データ
 P3-msms-eidou.jpg  P3-msms-band-2.jpg
データ左:レーンA:Protein Ladder One、レーンB:BSA,Triple-color(製品番号:01859)をExtra PAGE One 5-20%ゲルのグラジエントゲルを用いて、SDS-PAGEに供した。SDS-PAGEの2、3、5、6、7、10のバンドについてMS解析を行った。以下では、バンド2、6、10について取り上げ説明する。データ右:ここでは、バンド2のタンパク質のMS/MS解析の結果を示しており、Glutamate-ammonia-ligaseと同定された。
●バンド6のMS/MS解析データ ●バンド10のMS/MS解析データ
P3-msms-band-10.jpg
同様にバンド6および10についてもMS/MS解析を行った。得られた推定アミノ酸の配列によりタンパク質を同定した結果、バンド6のタンパク質は、3-dehydroquinate synthase、バンド10のタンパク質はmoaDと同定された。同様に、その他のバンドもMS/MS解析により同定が可能であった。以上の結果より、Extra PAGE Oneにより分離したタンパク質は、高分子側から低分子側のタンパク質に至るまで、MS/MS解析に問題無く適応できた。

■短時間電気泳動

(データご提供:近畿大学農学部 応用生命化学科 森山 達哉 准教授 矢野 えりか 研究員)

●CBB染色
P4-tanjikan-CBB.jpg
●Western Blotting
P4-tanjikan-WB.jpg
<サンプル>
大豆タンパク質 アプライタンパク量(1lane当たり) 
①40μg ②20μg ③10μg ④5μg
WEPバーティカル高速泳動槽は500Vの電圧をかける事により短時間で泳動する事も可能である。本泳動槽を用いてExtra PAGE One並びにLaemmli法ゲルを用いて、300V(35分間)、500V(18分間)の条件下で泳動を行った。その結果、500Vの条件下での泳動は通常条件(300V)と遜色無く泳動可能であり、ウェスタンの結果にも変わりが無い事が示された。

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価格表
製品名ウエル数製品番号価格オンライン
カタログへ
Extra PAGE One Precast Gel 5-10% 12wells 11953-74 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 5-10% 16wells 11954-64 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 5-20% 12wells 11955-54 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 5-20% 16wells 11956-44 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 7.5-15% 12wells 11957-34 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 7.5-15% 16wells 11958-24 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 10-20% 12wells 11959-14 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 10-20% 16wells 11960-74 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 7.5% 12wells 11961-64 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 7.5% 16wells 11962-54 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 10% 12wells 11963-44 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 10% 16wells 11964-34 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 12.5% 12wells 11965-24 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 12.5% 16wells 11966-14 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 15% 12wells 11967-04 18,500 e-Nacalai.jpg
Extra PAGE One Precast Gel 15% 16wells 11968-94 18,500 e-Nacalai.jpg

規格:SP 貯法:冷蔵 容量:10枚

※記載の内容は、'13年7月現在の情報に基づいております。

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